保幼激素类似物对斜纹夜蛾核多角体病毒增殖的影响.pdf

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保幼激素类似物对斜纹夜蛾核多角体病毒增殖的影响 专 业:动物学 硕 士:刘永平 指导老师:王方海副教授 摘要 litura 斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera 研究所利用该病毒已成功研制了斜纹夜蛾核多角体病毒杀虫剂一“虫瘟一号”并 实施产业化生产,但如何高效低成本增殖该病毒是当前产业化生产中亟待解决的 问题之一。由于利用细胞培养大量增殖病毒成本太高,难以在病毒杀虫剂大规模 生产中应用,因此采取人工半合成饲料来饲养寄主昆虫增殖病毒是当前国内外普 遍使用的方法。就病毒增殖环节而言,主要应提高病毒的感染死亡率和单头寄主 病毒含量。影响上述两个指标的因素很多,包括:昆虫品系、感染龄期、毒株、 接种浓度、饲料、湿度、温度、光照、收获病毒时间等。就寄主昆虫感染龄期而 言,多数研究表明,最适感染龄期在倒数第二龄,但在该龄期感染的幼虫死亡时 的生物量或体重并非最大。因此,如何在寄主获得最大生物量后使其感染死亡是 进一步提高病毒增殖产量的关键。 hormone 保幼激素类似物(Juvenileanalogue,JrtA)是一类具有保幼激素活性 的化合物,具有调控昆虫变态和生长发育的作用。用JI-IA处理昆虫幼虫,可阻 止幼虫发生变态,延长幼虫期甚至产生超龄幼虫。鉴于此,本文拟用JI-IA处理 斜纹夜蛾幼虫,延长其末龄历期并使虫体相对增大,从而达到提高昆虫杆状病毒 单位产量的目的,为今后广泛利用JHA进行高效率、低成本增殖昆虫杆状病毒 杀虫荆提供理论依据和方法。 合的方法筛选三种主要因子(病毒感染浓度、JHA用量和JHA施用时间)对提 高病毒增殖产量的最佳组合。结果以1×107PIBs/mL感染6龄刚蜕皮的斜纹夜 蛾幼虫,并于感染第l天滴加lOngmethoprene,病毒增殖产量最高,病毒总产 量和平均病毒产量分别为1875亿PIBs和62.2亿PIBs。 以幼虫的体重变化、取食量、食物消化率、食物转化率、平均每克虫尸病毒 含量为指标,研究了methoprene和病毒对宿主消化生理的影响。结果表明, methoprene处理能提高幼虫取食量、寄主的食物转化率和单位虫尸病毒含量。 和5—6d均可促进脂肪体中POLH的合成。 通过荧光定量PCR(Real—time quantitative 斜纹夜蛾核多角体病毒在幼虫血淋巴液复制的影响主要发生在处理后4—5d,该 期间POLH基因的拷贝数显著增加,峰值含量可达到1.22X 10”copy/ml。 关键词:斜纹夜蛾核多角体病毒保幼激素类似物Methoprene增殖机理 Ⅱ TheEffectof Hormone Juvenile on Analogues of litura Multiplication Spodoptera Nucleopolybedrovirus Speciality:Zoology Name:LIU Yong—ping Supervisor:Dr.WANGFang-hai Abstract The litura

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