普瑞巴林结构确证及质量研究.pdfVIP

摘 要 普瑞巴林是一种新型 γ-氨基丁酸 （GABA ）受体激动剂，用于治疗神经性疼痛， 局部发作性癫痫和焦虑症。2004 年 12 月美国食品与药品管理局(FDA) 批准用于治 疗糖尿病性周围神经病变的神经性疼痛和带状疱疹后遗神经痛。其作用机制是作 为配体与 α2-δ亚基结合，后者与电压依赖性钙通道有关，通过调节钙通道减少钙 离子进入神经末梢，使几种兴奋性神经递质释放减少。在血中不与血浆蛋白结合， 也无肝代谢，通过肾脏排泄，起效快，副作用小且时间短，多数病人可以耐受。 普瑞巴林为 S 构型光学手性化合物，目前尚未在国内市场上市，也未被国内外药 典收载。本文对重庆医药工业研究院试制的普瑞巴林（以下简称“本品” ）进行系统 的质量研究，为科学制定其质量控制标准提供了依据。 重庆医药工业研究院采用自行设计的合成路线得到具有结晶形态的普瑞巴林， 本文采用紫外（UV ）、红外（IR ）、质谱（MS ）、核磁共振谱（H-NMR ，C-NMR ） 等波谱技术确证了结构，以国外样品为对照通过 HPLC 柱前手性衍生化方法确定 了其构型；并重点对本品的有关物质、光学异构体、残留溶剂和含量测定进行了 系统的评价研究。 有关物质测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Aichrombond AQ C18 ），以 磷酸盐缓冲溶液（取磷酸二氢钾 0.12g、磷酸氢二钠 0.56g，加水 1000ml 溶解）- 乙腈（95 ：5 ）为流动相，检测波长为205nm ，理论板数按普瑞巴林峰计算应不低 于 1500。该测定条件能与中间体，以及酸、碱、氧化破坏的的降解产物能完全分 离。 本品合成工艺中使用了二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、异丙醇、异戊醛、乙酸 乙酯和丙二酸二乙酯。根据 ICH （人用药物注册技术要求国际协调会）和中国药 典的相关技术要求，采用气相色谱法进行了研究，各溶剂达到很好的分离，满足 其残留溶剂的测定要求。 a 利用 N - （5-氟-2，4-二硝基苯基）-L-丙胺酰胺（FDNPAA ）为柱前手性衍生 化试剂，该试剂的摩尔比在 2.96 以上与普瑞巴林可定量反应生成的化合物可用普 通色谱柱分离测定普瑞巴林中的光学异构体。最佳色谱条件为 Inertsil ODS-2 柱 （5μm ，250mmx4.6mm ），流动相为三乙胺缓冲液（取三乙胺 7.0ml，加水 1000ml， 用磷酸溶液调节 pH 值至 3.0 ）-乙腈（55：45 ，V/V ），紫外检测波长为 340nm 。普 瑞 巴 林 光 学 异 构 体 衍 生 物 的 色 谱 峰 分 离 度 大 于 4 、 最 小 检 测 限 为 -8 3.79x10 g/ml(S/N=3)，该法准确、可靠，适用于普瑞巴林或普瑞巴林制剂的质量控 制。 I 含量测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Aichrombond AQ C18 ），以磷酸 盐缓冲溶液（取磷酸二氢钾0.12g、磷酸氢二钠 0.56g，加水 1000ml 溶解）-乙腈（95 ： 5 ）为流动相，检测波长为205nm 。建立了普瑞巴林含量的测定方法，所建立的检 -7 查 方 法 具 有 良 好 的 专 属 性 ， 最 小 检 出 浓 度 为 1.890×10 (g/ml) ， 在 0.2082~1.6656mg/ml 的范围内线性关系良好，线性方程为 A=1730.20C+4.608(其中： A-HPLC 图中主峰峰面积，C-样品溶液浓度) ，相关系数为 1.0。方法精密度 RSD 为 0.3% 。 在以上研究的基础上，制定了符合相关技术要求的普瑞巴林临床用药质量标 准。 关键词：普瑞巴林，手性衍生化，质量控制，结构确证 II ABSTRACT Pregabalin is a novel gamma-aminobutyric acid （GABA ）analogu