生物反应器在组织工程学中的应用.pdf

生璺丝妻!堕型查堂 些堕型堡土里壅竺丝窭 !!：窭塑些 生物反应器在组织工程学中的应用 中文摘要 )7 在组织工程学的研究中，为了增加细胞数量，改善细胞活性，促进 组织形成，通常将种子细胞与支架材料进行三维立体复合培养。但由于 受到地球重力、流体剪切力等的影响，常规在培养板中进行的静态复合 培养往往出现细胞分布不满意、仅材料与培养板的接触面黏附较多，生 长状况欠佳等现象。为了在培养过程中减少不良影响因素的作用，改善 细胞在三维载体中的分布和生长状况，本试验拟采用生物反应器(旋转 培养仪)进行三维培养，以达到促进细胞黏附、生长的目的)一 尸 (11的) cell !学组织工程研究中，通过普通培养板和旋转培养仪‘R。taq Culture (Porous 工程学中的应用及组织工程研究中种子细胞的扩增方法问题。 芒一一 ／材料和方法 1、 BMSC的体外培养：16号骨穿刺针自成年新西兰大耳白兔的骼 于5％C02、37。C培养箱培养。倒置相差显微镜观察细胞生长情况， 定期换液、传代。AKP染色。 厂 2、 !里塑型堕型查堂 I堕堕型堡±塑塑生笙苎————土望!!兰一 夕在普通培养板中复合培养8小时后转移到旋转培养仪中进行旋转培 养，于第三天、一周和两周取材，行扫描电镜观察和细胞计数，与 培养板培养法对比细胞在PHA上的生长状况和增殖情况。并将消 化下来的细胞重新在培养瓶培养，贴壁后行AKP染色，与旋转培 养前进行对比。 结果 1、BMSC体外培养：细胞24小时后开始贴壁，伸展呈梭型，5～7天 后长满瓶底，进入传代生长后速度明显加快，2～3天后可长满并可 重叠生长。AKP染色呈阳性。 2、生物反应器对三维培养的影响：普通培养板中细胞主要黏附在 PHA与培养板相接触的一侧，在载体的内部难以见到细胞分布，孔 隙中细胞贴壁或在裂隙中生长。RCCS组中细胞均匀分布于材料的 各个部位，中心亦有细胞附着，在孔隙直径在70～300um左右的孔 隙中，细胞除了贴壁生长外，还有大量的突起相连，交织呈网状。 结论 l、骨髓基质细胞具有多向分化潜能，经定向诱导后，可以向成骨细 胞分化。 2、应用旋转培养仪进行三维立体培养可创造局部微重力环境，有利 与细胞在支架上生长，从而提高细胞数量，改善细胞状况≥一 关键词：多孔羟基磷灰石 骨髓基质细胞 旋转培养仪，常铝?释考 中l訇怫和医科大学 临床型硕十研究生论文 英文摘要 of intissue bioreactor Application engineering ABSTRACT Intissue cells cultivatedwith research，seed engineering usuallycompou