RNA干扰抑制IL-23表达对感染后内脏高敏感小鼠肠黏膜固有层DC活化Th17细胞功能的影响.pdfVIP

胃肠病学 2012年第 17卷第 2期 · 101 · RNA干扰抑制 IL．23表达对感染后内脏高敏感 小鼠肠黏膜固有层 DC活化Thl7细胞功能的影响 汪之沫 王文峰 龙艳芹 汪 欢 钱 伟 侯晓华 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科 (430022) 背景：前期研究发现感染后 内脏高敏感小 鼠肠黏膜 固有层树突细胞 (DC)诱导活化 Th17细胞与肠道感染消退 后肠黏膜免疫系统的持续激活有关 。推测 DC可能系通过分泌 白细胞介素．23(IL一23)活化 I11l7细胞 。目的：应用 RNA干扰技术抑制 DC分泌 IL一23，探讨感染后 内脏高敏感小 鼠肠黏膜 固有层 DC活化 Thl7细胞 的机制。方法 ：建 立旋毛虫感染后 内脏高敏感小 鼠模型，以免疫磁珠分选肠黏膜 固有层 DC和脾脏 CD4~T细胞 。构建 、鉴定小 鼠IL． 23小发夹 RNA(shRNA)干扰质粒 ，以脂质体法转染 DC(A组)以抑制 IL．23表达 ，同时设置转染空脂质体 的DC(B 组)和转染无关序列 shRNA干扰质粒 的DC(C组)作为对照。各组 DC与 CD4~T细胞共培养 120h。以单独培养 的 CD4+T细胞 (D组)作为对照。以ELISA方法检测 DC转染前后培养上清液 中的IL一23水平 ，以及 DC与 CD4*T细 胞共培养上清液和 CD4~T细胞单独培养上清液 中的 IL一17水平 。结果：A组 DC培养上清液中的IL一23水平较转 染前显著降低 (P0．05)，B、C两组转染前后 IL．23水平无 明显变化 。A、B、C组 DC与 CD4~T细胞共培养上清液 中 的IL。17水平均较 D组显著增高(P0．05)，其 中A组显著低于 B、C两组 (尸0．05)，B、C组间差异无统计学意义 。 结论 ：感染后内脏高敏感小 鼠肠黏膜 固有层 DC可能通过分泌 IL．23活化 11l17细胞 ．参与维持肠道感染消退后肠 黏膜免疫系统的持续激活 关键词 感染后肠易激综合征 ； 内脏高敏感 ； 树突细胞 ；Thl7细胞 ； 白细胞介素 23； 白细胞介素 17； RNA干扰 EffectofIL-23RNA InterferenceonActivationofThl7CellsnIducedbyDendriticCellsfrom nItestinalLamina PropriainPostinfections VisceralHypersensitivityMice WANGZhimo，WANGWenfeng,LONGYanqin,WANG Huan,QIANWei,HOUXiaohua．DepartmentofGastroenterology,UnionHospital,Ton~iMedicalCollegeofHuazhong UniversityofScienceTechnology,Wuhan~30022) Correspondenceto：HOU Xiaohua，Emaihhouxh@public．wh．hb．cn Background：Previousstudyindicatedthatinpostinfectiousvisceralhypersensitivitymicethedendriticcells(DCs) from intestinallaminapropriacouldinducetheactivationofThl7 cellsandassociatedwith thesustainedactivation of intestinal mucosal immune system afterrecoveryfrom intestinalinfection．Itwaspresumedhtatthe effectofDCson activationofTh17cellsmightbemediatedbyinterleukin一23(IL-23)．Aims：Toinvestigatethemech