金属酞菁催化的氧化反应 对细胞色素P-450 催化的羟化反应的模拟.pdfVIP

金属酞菁催化的氧化反应：对细胞色素 P-450催化的羟化反应的模拟 张岱山 吴 越 （中国科学院长春应用化学研究所） 提 要 由金属酞菁 主（要是铁酞菁）、抗坏血酸、氧构成的单加氧酶P-450新模拟体系，对苯的羟化 具有显著的催化活性。实验证明，含氮大环配位体— 酞菁和一般的含氮配位体相比，对中心 金属离子的活化作用特别明显。根据电子光谱数据，发现由Fe2+、抗坏血酸与适当配位体形成 中间三元络合物是氧活化的重要步骤。据此，对其中抗坏血酸的作用以及形成中间双氧络合物 的可能途径作了理论上和实验上的阐明，并在此基础上提出了苯羟化的作用机理。 细胞色素P-450的第一个模拟体系是1954年由Udenfriend等提出来的[1]。三十年来， 特别是最近，这一领域内的研究工作相当活跃[2]。我们采用结构上与细胞色素P-450的 活性组份— 铁卟啉类似的铁酞菁为活性组份，组成了与Udenfriend体系类似的模拟体 系。通过对新体系中各组份作用的了解，并与前者相对比，确认由铁酞菁、抗坏血酸、氧组 成的中间络合物，特别是第五配位体的存在，是形成活性催化体系的必要条件，为进一步 对细胞色素P-450的模拟，以及深入认识羟化机理提供了有意义的信息。 实 验 部 分 一（）金属酞菁的制备及鉴定[3] 1．原料：脲素，二级，长春试剂厂；苯酐，化学纯，北京化工厂；钼酸铵，分析纯，北京 部队化工厂；三氯苯，进口分装。 2．制法：按反应： 将原料加入三口瓶中，以三氯苯为溶剂，在搅拌下徐徐升温至200℃妫，并在该温度下保持 4小时，然后自然冷却到100℃妫；出料，并用苯洗涤数次。干燥后用稀盐酸处理除去未反 1982年2月4日收到。 应的苯酐和金属盐，最后用98％浓硫酸重结晶精制。使用时用＞20％发烟浓硫酸磺化，制 成磺化金属酞菁。 3．金属酞菁的鉴定：对合成的金属酞菁用KBr压片法在Perkin-Elmer599B型仪 器上进行红外光谱分析；以氯化萘为溶剂在 SpecordUV-VIS仪器上进行电子 光谱分 析，所得谱图和能查得的标准图一致。金属酞菁中的元素氮和金属含量用普通化学方法 分析，对大多数金属酞菁，实验值与理论值相比，在误差范围之内。 二（）苯的羟化 1．原料：抗坏血酸 (AsH2)，分析纯，天津化学试剂一厂；苯，分析纯，天津化学试剂 二厂；丙酮，分析纯，长春化学试剂厂。 2．反应装置及操作：反应装置同文献[4]。试验时，在反应瓶中装入称重的催化 剂、抗坏血酸、介质和苯，在恒温(35±0.1℃?)、恒压 （1大气压）下以纯氧为氧化剂，通过测 定氧的吸收量进行动力学跟踪。 3．产物分析：产物苯酚通过气相色谱法分析并定量。色谱仪为上海分析仪器厂 100型。色谱柱填料由上海白色担体涂上15％聚乙二醇2M制成，柱长2米，柱温为 104℃妫，氢气流速为40毫升/分，氮气流速为50毫升/分，空气流速为800毫升/分。反应产 物的质谱图确认与苯酚的标准质谱图相同。 实 验 结 果 一（）化学模拟体系的选择 我们在不同介质中对比了分别含磺化铁酞菁、EDTA和纯铁离子等三个不同体系在 苯羟化中的活性。在所有介质中，磺化铁酞菁体系均具有最佳活性；在水介质中(pH=2) 的吸氧动力学曲线如图1所示。 二（）抗坏血酸浓度对体系催化性能的影响 抗坏血酸浓度对吸氧速度影响的实验结果表 明，抗坏血酸浓度愈小，起始吸氧速度愈大。图2 是磺化铁酞菁浓度以及氧分压一定时，以抗坏血 酸浓度的倒数为函数的起始吸氧速度曲线，明显 地反映出反应速度与抗坏血酸浓度的反比关系。这一