青贮过程中苜蓿蛋白的降解特性及化学添加剂对其影响.pdfVIP

摘要 L．)青贮是解决苜蓿在干草调制过程中由于雨淋、叶片脱落等造成损 苜蓿(Medicago$ativa 失的有效措施。但苜蓿在青贮时，其中的蛋白被大量降解形成非蛋白氮。而非蛋白氮不能被反刍 家畜有效地祠用，所以苜蓿青贮料相对于苜蓿鲜草和干草其蛋白的营养价值较低．本研究对苜蓿 在青贮过程中蛋白的降解以及单宁酸、甲酸和甲醛等对苜蓿青贮过程中蛋白降解的抑制机理做了 探讨，并分析了苜蓿青贮后其租蛋白，氨基酸组成的变化，蛋白降解所形成肽的种类及不同添加 剂对其的影响。在此基础上，利用体外法对苜蓿青贮料的营养价值做了初步评价。 试验一苜蓿青贮过程中氮组分和蛋白降解酶的变化及添加剂对其的影响 研究了苜蓿青贮过程中甲酸、甲醛及单宁酸对苜蓿青贮料中氮的组分及植物蛋白降解酶活性 and 水平的单宁酸(20 509·kg～DM)，并以未添加添加剂的苜蓿为对照。苜蓿在青贮开始到第7天 时，与其它添加剂处理相比，甲酸能够有效地抑制蛋白的降解。单宁酸没有甲酸和甲醛抑制蛋白 降解形成非蛋白氮、氨态氮和游离氨基酸氮的效果好，但从青贮开始到青贮35天的过程中，添 加高水平的单宁酸处理组苜蓿青贮科中非蛋白氮和游离氨基酸氮的增加量要低于对照组和其它 添加剂处理组。苜蓿青贮过程中，蛋白降解酶羧基肽酶随青贮时间的延长其活性降低的较慢，而 且在青贮第2天时仍保持79％的活性。青贮21天后，羧基肽酶在对照组，甲酸处理组。甲醛处 理组及2％和5％单宁酸处理组苜蓿青贮料中的活性分别为苜蓿鲜草酶活性的的4l％，49％，10 ％，30．5％和30％．酸性蛋白降解酶在青贮第2l天时也保持较高的活性，而对照组中氨基肽 酶则在青贮第7天时就失活，添加荆处理的苜蓿青贮料中其蛋白酶活在青贮第4天时就失活。 试验二苜蓿青贮过程中蛋白分子质量分布的变化 天时青贮料中蛋白分子质量分布的变化．结果表明。苜蓿青贮料中分子量在43．OkDa～97．4kDa 范围内的蛋白从青贮青贮的第l天至青贮的第35天之问变化不是很明显，而且在青贮的第35天 时有些蛋白才被降解。而分子量在31kDa～43kDa范围内的蛋白从青贮的第1天至青贮第14天 这段时间中逐渐减少，但之后从青贮的第2l天至35天时又开始增加．分子量在31kOa以下的蛋 白在青贮第5天后被大部分降解。同时，从第1天、第3天和第5天的蛋白带也可以看出，苜蓿 上述结果说明，苜蓿在青贮时其中的酶蛋白和细胞质及叶绿体可溶性蛋白被大部分降解，而剩余 的蛋白大部分为叶绿体膜蛋白。 试验三苜蓿青贮料肽分子质量分布及不同添加剂对其的影响 及不同添加剂对其的影响。苜蓿青贮时的处理为甲酸处理组(49·kg1DM)，甲醛处理组(Ig．kg。删)， 单宁酸(509．kg1DM)处理组及对照组。青贮时间为35天。将每个处理组的苜蓿青贮料制成不含蛋 为标准物。试验结果表明，对照组苜蓿青贮料浸提液中的肽多为小肽，即二肽和三肽。而甲酸处 理的苜蓿浸提液中多为3—7个氮基酸残基的寡肽，而小肽的含量较少。甲醛和单宁酸处理的苜 蓿浸提液中的肽链多为含有3—4个氨基酸残基的寡肽。同时，甲醛处理的苜蓿浸提液中也含有 一定量的7个氨基酸残基以下的寡肽．从洗脱峰的面积来看，添加荆处理组苜蓿浸提液中肽的含 量均高于对照组苜蓿浸提液中肽的含量，而且各处理苜蓿浸提液中的肽均为小于10个氨基酸残基 的寡肽。 试验四化学添加剂对苜蓿青贮粗蛋白及氨基酸组成的影响 根据康乃尔净碳水化合物和蛋白质体系，研究了甲酸，甲醛，单宁酸及这三种添加剂两两混 合处理对苜蓿青贮料中粗蛋白、氨基酸组成的影响。苜蓿在青贮40天后，其中的大多数真蛋白 转变成了FractionA即非蛋白氮，该糨蛋白组分不能被家畜有效地利用。而所有添加剂处理。 A的含量(P0．05)。真蛋白组分 特别时甲酸／甲醛混合处理组显著降低了青贮料中Fraction Fraction Bl在添加剂特别是甲醛处理组苜蓿青贮料中的含量显著高于其在对照组苜蓿青贮料中 的含量(PO．05)．而在甲酸／甲醛和单宁酸／甲醛混合处理的苜蓿青贮料中大部分真蛋白分别为 Fraction B3和FractionB2．除了甲醛或单宁酸处理的苜蓿青贮料外，对照组苜蓿青贮料中的 不能被家畜消化利用的真蛋白组分FractionC的含量与其它添加剂处理组中的含量差异不显著 (P0．05)。与对照组相比，苜蓿青贮料