坛紫菜核糖体蛋白S15a基因的克隆及高温胁迫表达分析.pdfVIP

坛紫菜核糖体蛋白S15a基因的克隆及高温胁迫表达分析.pdf

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36 12 Vol.36, No.12 2012 12 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Dec., 2012 文章编号: 1000-0615(2012)12-1826-08 DOI:10.3724/SP.J.1231.2012. 28118 坛紫菜核糖体蛋白 S 15a 基因的克隆及高温胁迫表达分析 梅高尚, 纪德华, 李 兵, 徐 燕, 陈昌生, 谢潮添* (, 361021) : 坛紫菜栽培中经常遭遇高温胁迫危害而产生烂菜现象,为研究坛紫菜在高温胁迫条件 下的分子应答机制, 分离并克隆高温胁迫应答的相关基因, 应用引物退火控制(ACP)技术对 耐高温型纯系 Z-61 叶状体在高温胁迫条件下的差异表达基因进行筛选时, 获得一条在高温 胁迫条件下表达水平显著降低的基因片段, 通过 5′-RACE 技术获得了它的全长, 命名为 Phrps 15a(GenBank 登录号:JN991055.1) 。该基因序列全长 676 bp, 包含一个 390 bp 的开放 阅读框编码 130 个氨基酸的核糖体 S15a 蛋白(PhRPS15a), 蛋白分子式为 C H N O S , 664 1066 188 180 7 由 3 条螺旋、7 个片层及 8 个环状连接组成, 与多个物种的 RPS15a 蛋白具有较高的序列一 致性(78%~80%)。系统进化分析表明,动物、高等植物、绿藻和坛紫菜 PhRPS15a 蛋白均享有 独立的进化分支, 但坛紫菜 PhRPS15a 蛋白与团藻和莱茵衣藻的亲缘关系更近。实时荧光定 量 PCR 分析结果表明, Phrps 15a 基因的表达水平与高温胁迫密切相关, 在高温胁迫条件下, Phrps15a 基因的表达水平极显著下调。 : 坛紫菜; 引物退火控制技术; 核糖体蛋白 S15a; 高温胁迫; 克隆; 表达 : Q 785S 917.3 : A ( Porphyra haitanensis) , , , , , ; 20 60 , , , , 910 , , , 80%, [1] , 15~26 , 9 [2], 26 , , , 10~15 d , , ,

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