猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ毒素的纯化及免疫原性研究.pdfVIP

猪的传染病 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 Apx Ⅱ毒素的纯化及免疫原性研究 1 1 1,2* 1,2 1,2 周家强 ，张洋溢 ，曹三杰 ，黄小波 ，文心田 摘 要 本研究将本室构建的原核表达载体pET-Apx Ⅱ在大肠杆菌 BL21 中进行原核表达。表达产物以包涵体的形式 存在，包涵体进过洗涤后通过亲和层析进行纯化，然后纯化后的蛋白进行Western-bloting 检测分析。将 100 只小鼠随 机分为5 组，血清1 型全菌灭活苗组，血清7 型全菌灭活苗组，Apx ⅡA 蛋白免疫组，血清7 型灭活苗+ Apx ⅡA 蛋白 免疫组以及PBS 对照组。每次免疫后一周，利用毒素Ⅱ建立的ELISA 进行抗体的检测，第三次免疫后一周，用浓度分 6 6 别为1.0×10 CUF/ml 和 1.5×10 CUF/ml 的1 型和7 型菌株进行攻毒。结果显示：单独Apx ⅡA 蛋白免疫