毛乌素不同类型沙地油蒿种群遗传分化的ISSR分析.pdfVIP

第 34卷 第 1期 中 国 草 地 学 报 2012年 1月 Vo1．34 NO．1 ChineseJourna1ofGrassland Jan．2012 文章编号：1673—5021(2012)01—003卜06 毛乌素不同类型沙地油蒿种群遗传分化的ISSR分析 高凤月 ，朴顺姬 ，王大川 ，包萨如拉 ，许庆杰 ，高 占成 (1．内蒙古大学生命科学学院／内蒙古草地生态学重点实验室一省部共建 国家重点实验室培育基地 ， 内蒙古 呼和浩特 010021；2．毛乌素沙地治沙研究中心。内蒙古 017300) 摘要 ：利用 12对微卫星引物对毛乌素沙地油蒿种群 的遗传分化、基因流进行分析 ，采用 Nei’S指数和 Shannon 指数估算 3个不同类型沙地种群的遗传多样性，计算种群相似系数和遗传距离，利用遗传距离构建系统树。结果表 明：(1)种群遗传多样性分析显示 ，油蒿种群多态位点百分率为 100 ，说 明油蒿种群基 因组 ISSR具有较高的多样 性。(2)在遗传距离为 6．0处可将 184个样株大致分为三类，涵盖了135个样株，占采样总量的73．34 。结合样地 定位记录，聚类结果与样株空间分布具有一致性，即可分为流动沙地、固定沙地、半固定沙地油蒿种群。(3)流动沙 地与固定、半固定沙地油蒿种群问的基 因流较小 ，分别为 0．7929和 0．6848，半固定与固定沙地油蒿种群 间存在着较 高的基 因流，为 6．2930。半固定与固定沙地种群 间的遗传一致度较高，为 93．77 ；流动沙地种群 Shannon指数低 。 关键词 ：油蒿；遗传多样性 ；遗传分化 ；ISSR 中图分类号 ：Q943 文献标识码 ：A 油蒿 (Artemisiaordosica)又名黑沙蒿，隶属菊 了 184个油蒿样株的叶片 ，对每个样株依次进行定 科蒿属龙蒿亚属 ，广泛分布在 内蒙古、宁夏、陕西、甘 位 、编号，具体见表 1。将采集的新鲜叶片装入变色 肃等地的固定、半固定沙丘，集 中分布于毛乌素沙地 硅胶内使其迅速干燥 ，带 回实验室储存于一2O℃的 和宁夏河东沙地 口]。油蒿具有耐旱 、耐沙埋 、抗风 冰柜内，以备DNA提取。 蚀 、耐贫瘠、易繁殖等特性，对毛乌素沙地景观的稳 1．2 研究方法 定性起着关键作用_2]。就地带性分布范 围而言，其 1．2．1 DNA 的提 取 东起暖温带典型草原的西部 ，西至半荒漠的东部，跨 将采集到的油蒿叶片用植物 DNA试剂盒 (北 越了半荒漠、荒漠草原和典型草原 3个不同的植被 京天根生化公司)提取 DNA，随机抽取 已经提好 的 类型[3]。由于油蒿为重要 的固沙植物，学者们从不 DNA样品于 0．8 琼脂糖电泳检测其纯度、产量及 同角度对其生物学特性、生态学特征进行了细致研 完整性 。ISSR引物序列参考 JosephG．(加拿大哥 究[4]，但关于油蒿种群遗传分化的研究报道 尚不 伦 比亚大学提供)以及张淑艳 的研究结果 ，从中优 多见 。 化筛选 出扩增片段清晰的 12个引物，分别为 UBC 简单重复序列 区问扩增多态 (Inter—simplese— 系列 中 的 UBC811、UBC820、UBC834、UBC835、 quencerepeat，ISSR)标记技术与 ALFP分子标记 UBC844、UBC845、UBC857、UBC859、UBC880、 相 比，具有 DNA模板用量少 、操作简单、实验成本 UBC881、UBC888、UBC889。PCR反应程序 ：94℃ 低等特点，近几年被广泛应用于植物种群遗传多样 预变性 5min，94℃变性 30s，53．5oC退火 1．5min， 性和遗传变异分析 [7]。本研究采用 ISSR分子标记 72℃延伸 1．