野油菜黄单胞菌野油菜致病变种一个脂多糖合成相关基因的功能鉴定.pdfVIP

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2017-09-04 发布于江苏
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野油菜黄单胞菌野油菜致病变种一个脂多糖合成相关基因的功能鉴定.pdf

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野油菜黄单胞菌野油菜致病变种一个脂多糖合成相关基因的功能鉴定摘要本研究通过致病性试验，从已构建的野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris 插入突变体库中筛选到一株致病力显著降低的突变体008G04。成相关的基因wxcB内。为研究wxcB基因与Xcc致病性的关系，利用自杀质粒pKlSmob作为同源单交换整合质粒，获得了该基因的非极性突变体3512nk。聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明，3512nk脂多糖。一抗原发生明显变化。胞外多糖产量为野生型8004的45．3％，相对致病力为野生型的10．7％。将PCR合成的wxcB全基因克隆至 pLAFR3，导入突变体中能够使突变体的o．抗原合成恢复正常，相对致病力恢复为野生型的64，6％。有趣的是，互补菌株的胞外多糖产量比野生型提高了4倍。该研究表明，wxcB基因参与了脂多糖o- 抗原、胞外多糖的生物合成，且与Xcc的致病性相关。关键词：野油菜黄单胞菌野油菜致病变种wxcB基因脂多糖胞外多糖 THE FUNTION IDENTIFICATIoNOFALPS B10SYNTHESISRELATED GENEOF剧Ⅳ册MrD^MS CAMPEsTRIs PN．cAMPEsTRIS ABSTRACT Avirulenceretardedmutant was 008G04selected fromthemutant of assay library byplant Xanthomonas constructed random campestrispv．campestris(Xcc)8004bytransposonTn59usA5 method．The was in mutagenasis insertedthewxcB-like Tn59usA5 gane．whichpresumptively involvedin 1’AIL—PCRand lipopolysaccharide(LPS)biosynthesis，localizedby sequencing．To thefunctionofwxcB inXcc mutantofwxcB 8004，a 3512nk，was identify nonoolar gene．natlled suicidevector 12nk virulence 35 mutantdecreasedthe generatedbyhomologous integration．The on Chinese to mutant no differencein radish，similar Tn59usA500