OsRACK1)功能的研究 - 扬州大.pptVIP

水稻RACK1基因（OsRACK1）的功能研究 姓名：曹丹丹 导师：梁建生 一、本研究目的及意义 水稻是全世界的主要农作物之一，现有120多个国家和地区培育种植。仅在亚洲就有20亿人从稻米及其副产品中摄取60%-70%的所需能量。我国以占世界7%的耕地养活占世界23%的人口，其中水稻作为我国第一大粮食作物，从事稻作生产的农户接近农户总数的50%，全国有60%以上的人口以稻米为主食(Khush GS., 1997)。水稻对我国粮食安全作出了巨大贡献。 专家预计，至2030年，我国稻谷年需求量将达2.56亿吨至2.72亿吨，但目前国内水稻年总产量刚刚接近2亿吨，因此到2030年，我国稻谷年产量必须比现在再增产6000万吨左右。而要挖掘稻谷增产的潜力，重要途径之一是提高单位面积产量。 提高水稻单位面积产量途径之一是在不断挖掘高产种质资源的基础上，不断提高水稻在不良生长环境下产量潜力的发挥。渗透胁迫是影响水稻生长发育，最终导致产量降低的最主要的环境胁迫之一(Boyer, 1982)。 在我国，盐渍土分布范围广，面积大，约占我国耕地面积的10%。由于大量盐渍化土壤的存在，使得相当大的一部分水稻，因受不同程度盐害的影响而使产量难以提高，使优良的水稻品种的增产潜力难以发挥。 同时随着全球气候变暖，干旱加剧，水资源日渐缺乏。以我国现有的水资源，难以支撑传统水稻的进一步发展。急需开展水稻节水栽培技术及相关抗旱性的基础研究，培育抗旱、高产、优质的水稻品种。 由于非生物逆境的复杂性，使人们在改良作物抗非生物逆境方面的结果并不理想。随着分子生物学的发展，应用分子遗传学途径和转基因技术可望阐明水稻抗逆的分子机理，提高水稻的抗逆境能力。 研究相关基因功能的最重要途径之一是筛选其突变体并对其功能进行分析(Loss of Function Assay)。我们从拟南芥植物中筛选到一个耐渗透胁迫的突变体，Atrack1。 二、RACK1的发现 RACK1最早在动物中发现，近年来，在许多包括植物和菌类在内的真核生物中都发现了哺乳动物RACK1基因的同源基因。第一个植物RACK1基因克隆自烟草BY-2悬浮细胞，是一个生长素诱导基因，之后在紫花苜蓿、油菜、番茄、拟南芥等植物中先后克隆到RACK1基因，并且发现所有植物RACK1蛋白氨基酸序列与哺乳动物RACK1蛋白具有约75%的相似性。 以拟南芥为例，拟南芥的RACK1基因仅含有1个约600个碱基的内含子，蛋白长度约为384个氨基酸，分子量为35784D，在所有组织中均见表达（Vahlkamp, 2000）。 Guo等人（2007）认为大部分植物物种RACK1基因不止一种，而动物等其他物种则只有一种RACK1基因。Chen等人（2006）在拟南芥基因组中发现了三种RACK1蛋白编码基因，分别命名为RACK1A、RACK1B、RACK1C，认为这三种蛋白均属于WD-40重复蛋白家族，并以Gβ结构为模板，构建了RACK1A的7叶片β螺旋桨结构模型。 哺乳动物RACK1作为支架蛋白而起作用，可同时与许多信号分子相互作用，从而调节不同的信号转导途径（McCahill et al., 2002），如细胞周期的调控（Mamidipudi et al., 2004），Ca2+的释放( Patterson et al., 2004)，核糖体的组装（Ceci et al., 2003; Sungupta et al., 2004；Nilsson et al., 2004），细胞骨架的重构（Osmanagic-Myers and Wiche, 2004）等。 植物细胞中RACK1是否具有支架蛋白的功能还未知，但由于植物RACK1蛋白氨基酸序列与动物RACK1蛋白高度相似，并且含有动物RACK1蛋白的结构功能域，包括WD-40重复的数目和位置、蛋白激酶C的结合位点等，说明植物RACK1蛋白至少具有动物RACK1蛋白的部分功能。 另外，由于植物RACK1基因最早是作为烟草BY-2悬浮细胞的一个生长素诱导基因而被发现的，由此推测植物RACK1蛋白可能在生长素介导的细胞分化过程中起作用（Guo et al., 2007）。同时，由于RACK1蛋白与G蛋白β亚基具有类似的WD-40重复结构，而这一结构又在不同的生物中具有很强的保守性，推测这一结构可能对生物具有十分重要的作用。 三、RACK1与G蛋白的关系 前人的研究也表明，拟南芥G蛋白可能与植物的渗透胁迫信号的转导过程有关(Wang et al., 2001)，本研究组从拟南芥中筛选到的rack1突变体具有较高的耐逆性，也暗示着RACK1蛋白可能参与渗透胁迫信号转导过程。 拟南芥植物中的RACK1蛋白与从烟草BY-2悬浮细胞中分离到生长素响应基因ARCA编码的蛋白高度同源。RACK1蛋白是一类属