干细胞与基因打靶技术在人类疾病模型动物中的应用.pdfVIP

中陶舒牧曾跃’’}乏会动物蒡}殖学分会第十【，I{埘学术研讨会论文集 干细胞与基因打靶技术在人类疾病模型动物中的应用 张嘉保。丁瑜，姜宁，任文陟，刘殿峰，陈承祯，陈健，袁宝 吉林大学农学郜实验动物中心，长春国家实验动物中心吉林长春130062 摘要人类重大疾病动物模型在生物医学及新药研发等领域有重要价值，可为阐明相关疾病发病机理、寻找疾病早期分子标志、 研究新的治疗方法、验证新的药物靶标和开发新药提供基础条件。近年来，以转基因动物、基因敲除动物和克隆动物培育成功为 标志，转基因、基因敲除，治疗性克隆、干细胞等技术被广泛应用于人类疾病模型动物领域。本文论述了干细胞技术的研究进展以 及在人类疾病模型动物方面的应用；介绍了基因敲除、条件性基因打靶，时空特异性基因打靶技术的原理与研究进展，对应用基 因敲除技术制作人类疾病模型小鼠的研究现状进行了评述， 关键词干细胞，基因打靶，模型动物 所有生物体的生命活动，都直接或间接受到基冈的控制。人类的疾病都不同程度地与基因有关。有些疾病直接起 因于单个基因的突变，有螳则由多个基因的突变引起，还有一些疾病的易感性与基因组内DNA序列形成的遗传性 有关。因此，基凶的分离、表达和克隆是目前功能性基冈研究的热点。基因敲除动物模型的建立，为研究人类疾病提 供了一个崭新的方法，尤其是遗传性疾病。将对人类疾病诊断、预防、治疗产生重要影响。 人类疾病的动物模型已经成为现代生物学和医学研究的一个必不可少的核心条件之一。人类的许多疾病都与 疾病发生组织或细胞的蛋白质表达差异有关，为了解疾病发病机制，在医学模型动物小鼠上进行某种蛋白质基因的 敲除，特别是特定组织、细胞，甚至特定细胞的某一发育阶段进行基冈敲除，有助于了解此蛋白质的功能及其在疾病 发生和发展中的作用。人类疾病动物模型对阐明相关疾病发病机理、寻找疾病早期分子标志、研究新的治疗方法、验 证新的药物靶标和开发新药提供基础条件，从而提升我国卡日关研究领域的自主创新能力和生物医药产业的竞争力 具有重要作用。 近年来，转基因、基因敲除、克隆(治疗性克隆)、嵌合、干细胞等技术被广泛应用于人类疾病模型动物领域，以转 基因动物、基因敲除动物和克降动物培育成功为标志，揭开了2l世纪生命科学新纪元到来的序幕。 1人类疾病动物模型的概念与意义 Model 1．1概念人类疾病动物模型(A|limal 表现的动物实验和材料。通过对动物各种疾病和生命现象的研究，进而推用到人类，探索人类生命的奥秘，以控制人 类的疾病和衰老，延长人类的寿命。人类疾病动物模型的研究，是生物医学的应用科学，研究人员可利用各种动物的 生物特征和疾病特点与人类疾病进行比较研究。， 1．2意义人类疾病动物模型避免了在人身上进行实验所造成的危害：临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制 出来；克服了人类某些疾病潜伏期长、病程长和发病率低的缺点：可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性； 可以简化实验操作和样品收集；有助于全面地认识疾病的本质。 2干细胞技术在模型动物方面的应用 人马里奥·卡佩基和奥利弗·史密斯，因为他们在改造活体内特定基因的”基凶靶向”技术等方面做出了奠基性贡 献。这三位科学家是冈为”在涉及胚胎干细胞和哺乳动物DNA重组方面的一系列突破性发现”而获得这一殊荣的。 这些发现导致了一种通常被人们称为“基因打靶”的强大技术。这一国际小组通过使用胚胎干细胞在老鼠身上实现 了基冈变化。 近年来，干细胞技术在模犁动物尤其是治疗性克隆方面进展迅速，展示了可喜的前景。 2002年3月，借助克隆技术成功对实验鼠进行了胚胎干细胞治疗，首次在动物身上证实”治疗性克隆”技术是 可行的。2002年lO月，中国中山大学用人工受精卵发育成的囊胚内细胞团建立了首个中国人胚胎干细胞系，使中国 在该领域跻身世界前列。 2003年4月，日本在世界上首次用猴胚胎干细胞生成两种末梢神经，这一成果拓宽了再生医疗的前景。 2004年5月，世界上首个国家胚胎干细胞库在英国伦敦建立，它可为糖尿病、癌症、帕金森氏症和阿尔茨海默氏 症等疾病的研究和治疗储存、提供干细胞。 2004年9月，美国首次用人类胚胎干细胞成功培育出了视网膜细胞，该技术有望用于治疗视网膜退化造成 的失明。 作者简介：张嘉保(1963一)．男。教授。研究方向：动物繁殖生物技术与遗传标记 144． 中固南牧静医学会动物繁殖学分会第十