荧光光谱法研究阿米卡星与DNA的相互作用.pdfVIP

第28卷，第10期 光谱学与光谱分析 2oo and ()ctober。2008 8年1O月 SpectroscopySpectral／’malysis 荧光光谱法研究阿米卡星与DNA的相互作用 张爱梅1，贾丽萍2 1．聊城大学化学化工学院，山东聊城252059 2．聊城大学材料科学与工程学院，山东聊城252059 摘要在pH6．0的THs-HCl介质中，以溴化乙锭为荧光探针，研究了阿米卡星与小牛胸腺DNA之间的 相互作用。采用荧光光谱、吸收光谱、Scatchrd方程、圆二色谱、黏度等手段，对作用机理进行了研究，结 果表明阿米卡星与小牛胸腺DNA之间的作用方式为混合方式，嵌入与沟槽作用是两种主要作用方式。求得 25℃时二者的结合常数为2．2×104L·nlol～。 关键词荧光光谱；紫外光谱；圆二色谱；黏度；DNA；阿米卡星；溴化乙锭 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000田593(2008)10．0279一02 阿米卡星(锄ikacin，A施)，是一种较新型的半合成的 抗菌谱广的氨基糖苷类抗生素，突出优点是对肠道革兰氏阴 性杆菌及绿脓杆菌产生的多种钝化酶很稳定，不会失去抗菌 活性，特别用作对卡那霉素和庆大霉素耐药的菌株的首选药 物，但有一定耳毒性和肾毒性。关于阿米卡星对DNA的损 8二∞o∞∞毒=T_■ 伤及其作用方式的研究目前仅有一篇文献，以电化学方法研 究得出其作用为嵌入方式。本文以溴化乙锭(EB)为荧光探 针，通过荧光光谱、紫外光谱、圆二色谱、黏度等研究阿米 卡星与DNA的相互作用，取得了相关信息，从分子水平上 W新elengthmm 探讨了其作用方式。 E娌酏ofAMK蚰DNA?EB’s Fj晷l n硼呻屯鞭朔∞e哪，ect咖 溴化乙锭(EB)是灵敏的DNA荧光探针，与双链DNA 发生嵌插作用后，使DNA的荧光强度大大增强，荧光发射 lO一5)mo卜L_1I嘲A=2．O×lO一5瑚l·L一1 峰位于593衄。但阿米卡星与EB共存时，便会发生与DNA ¨4 的竞争结合反应，影响EB与DNA的相互作用。图1是不同 浓度的阿米卡星对DNA-EB荧光强度的影响。可以看出，随 ∞3 着阿米卡星浓度的增加，DNA-EB的荧光强度明显减弱。表 明阿米卡星分子与DNA分子发生了相互作用，阿米卡星和 蛇2 EB竞争结合DNA上的位点，使EB分子与DNA分子的相 8暑售∞^lv 互作用减弱，使嵌入DNA的双螺旋链中的EB分子减少，使 叭l 荧光强度逐渐减弱，是阿米卡星与DNA碱基作用的结果。 0o 当fA加(／国蛆一1．5时(曲线5)，DNA-EB的荧光强度已下降 220 240 260 珈3003∞ 至初