三重PCR快速检测婴幼儿奶粉中的病原菌.pdfVIP

摘要 食源性疾病是食品安全的主要问题，时刻威胁着人们的健康和生命。在食源性疾 病中，细菌性食物中毒居首位。近年来，阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆 菌等病原菌引起的奶粉中毒事件时有发生。因此，食源性病原菌的检测是食品卫生安 全检测中一个重要的部分。 目前，对食品中病原菌的检测方法主要有传统的分离鉴定方法、免疫学方法和分 子生物学方法。其中，传统检测方法操作繁琐，检测时间较长，灵敏度较低；免疫学 方法的特异性和灵敏度不是很理想：分子生物学方法特异性较强、检测时间较短、灵 敏度较高。 三重PCR是一种在同一反应体系中加入三对特异性引物，同时扩增出三条目的 DNA片段的扩增方法。本文根据阪崎肠杆菌的外膜蛋白基因ompA、金黄色葡萄球菌 的耐热核酸酶基因tltlC、蜡样芽胞杆菌的溶血素基因hblA设计了3对特异性引物，进 行三重PCR反应，可实现对阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌三种食源 性病原菌的同时检测。对15株菌进行检测，结果4株阪崎肠杆菌、2株金黄色葡萄 球菌、1株蜡样芽胞杆菌均扩增出了特异性的目的条带，而另外的8株其它病原菌均 无扩增条带。将阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌的扩增产物测序序列在