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自体富血小板血浆对颗粒脂肪移植血运重建的影响 硕士生姓名： 宋楠 指导教师： 胡刚．教授 指导小组： 秦宏智教授 李芳教授 专业名称： 外科学 摘要 背景：自体脂肪移植由于其组织来源丰富、取材简便、操作简单、充盈外形 较好、无排斥反应等优点，被临床上广泛应用，是修饰软组织轮廓缺陷的良好填 充材料。富血小板血浆(PI冲)是自体血通过梯度离心得到的血小板浓缩物，其内 血小板含量丰富，能释放丰富的生长因子。很多研究已经证实PRP中的生长因子 对软组织和骨的愈合有促进作用，但是目前还没有PRP对脂肪移植后血运重建影 响的报道。 目的：本实验旨在通过建立裸鼠脂肪移植模型，将兔颗粒脂肪中加入自体富 血小板血浆混合移植，来探讨富血小板血浆对颗粒脂肪移植后血运重建的影响。 方法：健康新西兰大白兔6只各心脏采血25ml置于预选装有EDTA抗凝剂 的试管中，取3ml制备全血血浆，另取2ml用于全血血小板计数，其余20ml制备 富血小板血浆。每管10ml置于2个离心管中，2500r／min离心10分钟，吸上清、 中间层及红细胞下层1-2mm，移至另一离心管，摇匀。3200r／min离心8分钟， 氯化钙混合物的管中，4C冰箱过夜，待血凝块充分收缩后，4500r／min离心8分 钟，取上清，．20℃保存备用。同时无菌条件下取兔颈背部区脂肪垫，浸泡在PBS 缓冲液中，清除外包膜、明显的结缔组织和肉眼可见的小血管，用剪刀将脂肪组 织剪碎成1mm3大小，再用生理盐水反复冲洗后置入50ml离心管中静置备用。24 只雌雄不限的裸鼠，随机分为4组，每组6只鼠随机排序。每只裸鼠颈背部、背 部左右两侧为注射点，三点分别注射①、②或③组脂肪混合物。①实验组：颗粒 毒后在裸鼠背部标记的三点分别做一长约0．2cm切口，皮下钝性剥离出直径约 1．5cm的腔隙，分别填入脂肪组织混合物后缝合切口。术后1、2、4、12周分别处 死1、2、3、4组各组6只裸鼠。取出移植物置于体积分数10％多聚甲醛缓冲液中 固定，经脱水、透明、石蜡包埋。沿标本纵轴制成49m厚石蜡切片，每个标本切 片5张，一张做HE染色，4张做CD34免疫组化。对全血和PI冲进行人工计数， Weidner双盲计数法计算每张组织切片的微血管密度，分析结果。所得数据 SPSS16．0统计软件进行统计分析，数据用X4-S表示，并以P0．05为有显著性差异。 结果：24只裸鼠均无感染或死亡。全血血小板计数为(380．3±50．6)x109／L， 各个时相的PRP处理组微血管计数均高于全血血清组及生理盐水组，其中1周和 全血血清组与生理盐水组各个时相差异均无显著意义(P0．05)。 结论：富血小板血浆在颗粒脂肪移植初期能够促进组织血运重建。 关键词：富血小板血浆 脂肪移植 微血管计数 effectof at plasmaearly Angiogenicplatelet—rich of Stageadiposegrafts Master Nan degreecandidate：Song Supervisor：Prof．HUGang Vice—supervisor：Prof．QinHongzhi Prof．Li Fang Major：Surgery Abstract