青岛地区宫颈上皮内瘤变中HPV16+E6和E7多态性分析.pdfVIP

{两 妻 目的 HPVl6基因多态性在不同的地区存在着差异，并可能导致HPV的致病性发生 改变。本实验拟分析宫颈上皮内瘤变III级组织中，HPVl6主要的致癌基因E6、E7 的突变情况，以探讨山东青岛地区癌前病患中HPVl6E6和E7基因的主要突变特征 与突变型别，为防治宫颈癌提供新的研究思路。 方法与材料 1．收集51例于青岛大学医学院附属医院妇科行宫颈冷刀锥切治疗的石蜡组织 标本，病理诊断均为宫颈上皮内瘤变IⅡ级。这些患者均首次于妇科门诊就诊时通过 高危型HPV分型检测。 DNA。 3．把提取得到的DNA作为模版，进行PCR扩增，获得E6和E7完整基因片 段。 4．纯化得到的基因产物，并进行碱基测序，与Genbank中HPVl6E6、E7标准 序列进行比对分析，寻找HPVl6E6和E7的改变。 结果 全基因片段，其中30例(93．75％)存在碱基突变。 E—P(9132)型和E(2／32)型。 3．32例扩增出E6、E7基因片段的组织中，E6基因共发现7个突变位点，其 中6种有义突变，其中发生T178G突变的共有21例。E7基因有11种碱基突变， 有7种突变可导致氨基酸改变；其中常见的突变位点及发生例数分别为A647G(22 酸置换。 4．E6 T846C、 T178G和E7A647G是常见的联合突变位点。 结论 E6、E7基因碱基序列跟Genbank中标准株比较存在多种 山东青岛地区HPVl6 突变。 硕士研究生王玉洁(妇产科) 指导教师 车艳辞副教授 关键词：宫颈上皮内瘤变；人乳头瘤病毒16；E6；E7；基因多态性 ABSTRACT objective HPVI 6 differedbetween itwouldincreasetheriskofcervical gene regions，and polymorphism the of E6andE7 cervical carcinoma．We mutation analyzed oncogenes during intraepithelialneoplasia andtherelation III tO the ofHPV1 6E6／E7 between lesions，andtry polymorphism investigate genes themutationsanddifferentofcervicallesionsin stages Qingdao． Methods 1．51 conization ascervical III(CrNIII)were paraffinsamplesdiagnosed intraepithelialneoplasia collected，These showedHPVl6 at clinic，the patients’HPVgenotyping positiveGynecology Affiliated ofMedical from 10toDes．201 1． Hospital CollegeQingdaoUniversityMay．20 2．DNA theCINIII