Humanspermtailproteomesuggestsnewendogenousmetabolicpathways人类精子尾部蛋白及其代谢途径.pptxVIP

Human sperm tail proteome suggests new endogenous metabolic pathways 姓名：李杜学号：2120540专业：生物医学工程目录文章来源研究背景研究新意实验过程实验结果结果讨论文章来源研究背景本文新意研究精子尾部低浓缩状态的特殊蛋白质对精子能量代谢过程的影响。精子是如何利用一系列的酶，产生ATP供能？产能机制是糖酵解还是线粒体氧化磷酸化或者精子还存在其他的产能机制？取材、准备化学试剂实验流程图精子准备细胞免疫化学分析分离精子的头部和尾部α-微管蛋白的表达和细胞色素c氧化酶ⅠWestern blotting透射电子显微镜分离后精子尾部片段分析蛋白质溶解精子尾部蛋白质分离和确认SDSLC-MS/MS精子尾部蛋白质组分析（分析与精子新陈代谢有关的蛋白质）找蛋白质数据并翻译蛋白质抑制脂肪酸氧化分解精子全面分析过氧化物蛋白质的表达实验结果及其分析Table I. Metabolic pathways that are likely to contribute to the production of energy in human sperm. Data were analysed using Reactome. 由糖异生和半乳糖分解代谢推测精子可能存在脂质代谢精子可以利用酮体来分解饱和、不饱和脂肪酸（线粒体β氧化）氧化极长脂肪酸链（涉及过氧化酶）Hoechst是一种DNA正染料大多数α微管蛋白存在于尾部α微管蛋白分子量为55 KDa电镜观察人体镜子尾部片段Ax-鞭毛抽丝Odf-外部致密纤维Ms-线粒体鞘Fs-纤维鞘通过质谱观测到的1049种蛋白中，有大约一半（527种）的蛋白质新发现的。精子尾部蛋白精子尾部蛋白功能和分布比例图证明精子体内产ATP除了糖酵解和氧化磷酸化还可能存在其他途径脂质体代谢包括：脂肪酸氧化、肉碱穿梭、酰基肉碱传递、酮体代谢、甘油降解、磷脂和甘油三脂的合成A-免疫化学方法证明PEX 11和ACAA 1 的存在，说明精子中确有过氧化物酶B-Western blotting 测定不同精子样品中ACAA 1的分子量PEX 11（过氧化物酶体膜蛋白11）ACAA 1（过氧化物-3-酮脂酰辅酶A硫解酶）8组样品精子中ACAA 1的分子量大致在44 Kda左右讨论与分析Argument : 糖酵解产ATP or线粒体产ATP ？Fact ：精子能够完全利用内源底物存活5天。Doubt：无糖酵解底物时，精子能否氧化体内脂肪酸供能？Discovery：过氧化物酶可分解长链脂肪酸。Fact ：人体精子中含有许多过氧化物蛋白。