医学资料-成功实施一例去除母体细胞污染的大疱性表皮松解症的产前诊断.pdfVIP

史堡廑腿整基盔2Q螋生2旦签生2鲞笠2羽￡h地』堕墅堕堂J女!Y2Q螋，№!!垒2：邕Q：2 ·论著· 成功实施一例去除母体细胞污染的大疱性 表皮松解症的产前诊断 梁键莹 陶炯 张定国 祁怀山 杨丽萍杨祖菁虞荷莲姚志荣 【摘要】目的对一例已生育过Hallopeau—Siemens型隐性营养不良型大疱性表皮松解症患儿且突 变位点明确的孕妇进行DNA为基础的产前诊断，并探索诊断过程中母体细胞污染的排除方法。方法于 孕16周行羊膜腔穿刺术，抽提羊水细胞中胎儿基因组DNA。PCR扩增、DNA直接测序法明确胎儿是否带 有致病突变。羊水细胞贴壁培养技术将羊水中胎儿细胞与母体血细胞分离，去除母体细胞污染。核型分析 法以期证实羊水中有父源性信息。微卫星标记连锁分析技术进一步证实胎儿基因型。结果B超下示胎 盘位于腹前壁。故穿刺针无法避开胎盘，须经腹肇、胎盘后入羊膜腔抽取羊水，离心后示羊水细胞中有肉 眼可见血细胞污染。直接测序显示，孕妇已生育的女儿 7岁，已确诊为Hallopeau—Siemens型隐性营养不 良型大疱性表皮松解症 12号外显子上有母源性突变R525X，105号外显子上有父源性突变R2610X，胎 儿12号外显子上存在和母亲相同的突变R525X，105号外显子正常。为排除该结果为穿刺过程中母亲血 细胞污染羊水所致，将羊水细胞贴壁培养后，再次进行直接测序及家族单倍型连锁分析，显示两次直接测 序和连锁分析结果一致，排除母体污染，证实胎儿为带有与母亲相同突变的临床表型正常的携带者。孕妇 于孕40周产下一表型正常女婴。结论用直接测序、羊水细胞贴壁培养、核型分析、连锁分析等多种技术 联合，可提高产前诊断准确性。 【关键词1表皮松解，大疱性，营养不良性；产前诊断 Successful eliminationofmaternalcellcontaminationina with prenataldiagnosisfollowing famny bullosa recessive LIANG dystrophicepidermolysis Jian-ying,了1AoJiong,ZHANGDing-guo．Q1 of Huai-shan，yANGLi-ping,YANG Dermatology,Xin- Zu-jing,ⅢHc—lian，yA0乃j·tong．Department boa School U试versityofMedicine,Shanghai Hospital,ShanghaiJiaotong 200092,China Correspondingauthor：yA0历i-tong,Email：zryaosmu@sohu．corn To aDNA-based ina withrecessive 【Abstract】Objectiveperform prenataldiagnosisfamily dys— in to a toeliminatematemaleellcontaminationamniotic trophicepidermolysisbullosa,anddevelopstrategY fluid Amniocentesiswascarriedoutat week fluidculturewas samples．Methods gestation16。amniotic