东乡野生稻内生放线菌FRo2鉴定、培养条件优化及活性产物分离.pdfVIP

东乡野生稻内生放线菌FR02鉴定、培养条件优化及活性产物分离 摘要 植物内生菌具有对宿主植物良好的亲和性及促生性，其丰富的代谢产物可用 于生物防治。当前，大约75％抗生素是由放线菌产生。东乡野生稻是一种重要的 种质资源，其独特而丰富的内生菌是一宝贵的生物资源。从东乡野生稻中筛选到 的内生放线菌，可以作为农用抗生素开发的新资源。 本研究利用形态与培养特征观察、生理生化特性和结合16SrDNA基因序列 venezuela)、吸水链霉菌(Streptomyces (Streptomyces carnosus)。4株放线菌发酵 rochei)、肉质链霉菌(Streptomyces 液均有较广的抑菌谱，而菌株FR02对于主要参照的7种常用病原真菌显示出更 强的抑制作用，具有较好的开发前景。 的耐受范围是0～12％(w／v)；其细胞壁化学组分氨基酸属于I型，糖型为C rochei)。菌株FR02传 型，进一步验证了FR02为娄彻氏链霉菌(Streptomyces 代稳定性好，其发酵液抑菌活性物质稳定性好，不能被蛋白酶降解，且在温度 2～10和紫外照射条件均有较好的抑菌活性。 50～1000C、pH 通过抑制菌丝生长速率法，对菌株FR02的发酵培养基和发酵条件进行了优 化，实验结果得到的发酵培养基配方为玉米粉4％、黄豆饼粉1％、淀粉2％、KN03 0．3％和NaCl0．05％。通过对其发酵条件的初 0．025％、KzHP040．025％、CaC03 步优化，其最佳发酵条件为：发酵初始pH8．0，发酵温度280C，接种量10％， mL／250mL，摇床转速120 装液量50 r／min。在最佳发酵条件下培养的发酵液对 小麦赤霉菌的平均抑制率为81．7％。 利用有机溶剂萃取、多种柱层析结合生物自显影薄层层析活性追踪等方法， 对菌株FR02活性组分进行了分离纯化，得到具有抑菌活性的化合物AW2。通 过GC．MS、1HNMR(氢谱)和14CNMR(碳谱)对其进行结构鉴定，确定知 化合物为邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate)。 关键词：东乡野生稻；内生放线菌；菌株鉴定；抑真菌活性；培养条件优化 Condition andBioactive Identification，Culture Optimization Product of FR02from wildrice SeparationActinomyceteDongxiang Abstract isof and tothehost EndophyteaiTmity plantgrowth-promotingability plant， rich metabolitesCanbeusedfor contr01．So 75％ moreover，its biological far，about oftheantibioticswere wild producedbyactinomycetes．Dongxiangrice(Oryza an its andrich isa