异丙酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠肝TLR4%2fMD-2基因表达的影响研究.pdf

．．f ，。 』一≥! “…’‘。‘…。’…’ o 厶套-n· ·．…··- ， ……，． ．／掣嘲幽 异丙酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠肝TLR4瓜D．2基因 表达的影响研究 · 摘 要 复制脓毒症大鼠模型，以异丙酚、地塞米松以及二者联合应用进行早 differentiation rec印tor4／Myeloid 差异，为脓毒症器官保护提供依据。方法：100只健康、雄性SD大 鼠(泸州医学院动物实验中心提供)，其中80只采用大鼠尾静脉注射 脂多糖法复制脓毒症大鼠模型，另外20只健康大鼠为正常对照组烈 松组(LPD组)，每组20只。每组再依照注射相应药物后1h、2h、4h、 L组：静脉注射LPS 10mg．kg。及等量生理盐水；LP组：静脉注射 LPS10 mg．kg。1和异丙酚5 mg．kg～，继以异丙酚5mg．蚝～．h．1的速度使 lO 用微泵持续静脉泵注至处死时间点；LD组：静脉注射LPS mg．蚝J +地塞米松o．1 10 mg．kg～；LPD组：静脉注射LPsmg．kg。1+地躲 松O．1mg．kg‘1+异丙酚5 mg．kg～，继以异丙酚5mg．kg～．h。1的速度使 用微泵持续静脉泵注至处死时间点；N组：静脉注射生理盐水10ml。 各组分别于处死动物后留取肝脏标本，以半定量逆转录多聚酶链反应 rnJ5斟A，MD一2删5斟A 技术(RT．PCR)及相关软件分析不同组TLR4 表达。另留取肝组织用10％福尔马林磷酸盐缓冲液固定24h后石蜡包 埋、切片，HE染色光学显微镜下观察肝脏组织病理情况。 结果：1、 TLR4基因相对表达量及分析结果：(1)正常对照组大鼠肝组织可见 少量TLR4 LDP组在各时间点同L组比较，其结果显示肝TLR4酬fⅢA表达明 组内比较显示肝TLR4In】}ⅢA表达均于1小时明显升高，之后渐下 mRNA表达；(2)L 结果：(1)正常对照组大鼠肝组织可见少量MD．2 组注射脂多糖后1小时MD．2IIl】斛A表达明显升高，之后渐下降 比较，其结果显示肝MD．2n删A表达明显降低，但高于对照组水平 均于l小时明显升高，之后渐下降；(4)LDP组在各时间点同LP组、 ‘．‘q、。 LD组比较，LDP组Ⅷ．2 毒症大鼠肝脏TLR4mIⅢA与MD．2mRNA表达的相关分析结果表 O．041)。4、HE染色观察肝组织形态学改变：对照组肝小叶结构完整 清晰，肝细胞形态结构正常，肝窦清晰，窦内皮细胞、库普弗细胞均 未见明显变化。汇管区小叶间动静脉、小叶间胆管结构清晰，未见炎 细胞。L组可见肝细胞明显肿胀、胞浆疏松，肝小叶结构紊乱，窦腔 内有炎细胞聚集，门脉区有较多炎细胞浸润，肝窦间隙变宽，偶见点 状坏死。上述变化在药物干预后表现有所减轻。结论：1、正常大鼠 肝组织内可见少量TLR4、MD．2mRNA表达，LPS可迅速上调肝组 织中TLR4瓜∞．2基因的表达；2、地塞米松、异丙酚干预后， TLR4／MD．2枷5ⅢA表达明显下调，两药联用对脓毒症大鼠有明显保 护作用；3、肝组织中TLIH／MD．2基因的表达与早期脓毒症的发生、 发展密切相关，两种基因的删刚A表达呈显著正相关，动态监测 TLR4／MD2删附A改变对脓毒症的发病及治疗具有一定的指导意义； 4