抑制P-糖蛋白表达逆转胰腺癌多药耐药.pdf

Ⅷ㈣㈣洲0㈣＼帆 Y1784673 抑制P．糖蛋白表达逆转胰腺癌多药耐药。 摘 要 中的P．糖蛋白的抑制作用和逆转其耐药性的效果。方法：选用人胰腺 癌耐药细胞株P!ANC．1，通过MTT法和免疫组织化学等方法，评价黄 芪对P．糖蛋白(P-gp)介导的耐药机制的逆转作用。采用MTT法测定 联合用药的情况下对胰腺癌细胞增殖作用的抑制效果，用免疫组织化 学的方法检测使用不同浓度的黄芪，5．氟尿嘧啶的情况下对P．糖蛋白 独抑制情况结果可见，两种药物与各自对应的对照组相比，均能明显 抑制胰腺癌PANC．1细胞的增殖，同一药物不同浓度组间均数的两两 比较结果显示：AST随其浓度的增高，对PANC．1细胞的抑制变化无 明显差异，而5．Fu随其浓度的增加出现抑制性增强，提示5．Fu对 PANC．1细胞的增殖抑制作用在一定范围内具有浓度依赖性。由5．Fu 单独作用于PANC．1细胞的增殖抑制作用结果可见，5．Fu对PANC．1 少药物浓度过大时可能产生的药物毒性作用，我们选择O．5u咖1作为 与不同浓度的AST联合用药时的最终浓度。由AST与5．Fu联合用 药对胰腺癌PANC．1细胞的抑制作用结果可见，不同浓度AST联合 近或大于两种药物单独用药抑制率之和，与单独5．Fu或相应浓度AST 组比较，差异有显著性，表明联合用药可显著提高单独用药对胰腺癌 PANC．1细胞的增殖抑制作用。联合效应分析结果显示，2．5m∥神、5 mg／ml的AST与5．Fu的联合效应为相加效应，10m∥ml、20 n拶7fnl 的AST与5．Fu的联合效应为协同效应。由各组实验地与Mml蛋 白表达免疫细胞化学染色结果可见，Mdr．1、心在PANC．1细胞中 的阳性表达均呈棕色反应。与心对照组相比，分别加入AST和5．Fu 作用24h后，胞质的棕色颗粒都出现明显减少，其中5．Fu组比AST 组作用下棕色着色颗粒多，AST在20m∥IIll的浓度下颜色变化比 5mg／IIll更为明显，表明药物作用下，怂蛋白的表达量出现明显降低。 IOD值的统计分析显示，不同实验组间与对照组相比心蛋白表达差 异具有显著性，脂对照组与5．Fu组之间魅表达无明显差异； 蛋白在不同组间的表达情况与地蛋白变化相似，各实验组与对照组 相比差异有统计学意义，Mdr．1对照组与5．Fu组之间Mml表达无明 著性。结论：在胰腺癌细胞中，P一糖蛋白呈高表达，针对P一糖蛋白， 黄芪能有效地抑制P—gp的表达及功能，从而拮抗P—gp介导的多药耐 药，显著提高化疗药物5一Fu对胰腺癌PANC一1细胞的增值抑制作用， 为逆转多药耐药展示了良好的前景。 关键词：多药耐药；P．糖蛋白；胰腺癌 f．0r10r 0lof InterfbringIntenerlngp—yCOprotelnp—ycoproteinreVerSIn2reversin2 adenocarcinoma pancreatic ectiVe：1’o thee目睹ctofASTon ABSTRACT：Obji11Vestigate ofhuman inhibitingP—gpexpressionpancreas att曲uteof MTT reVersingd11lg—resistallceP-gp．Methods：TheaIlal)，zed meceU ofPANC-lunderdifferentconcentrationof nlultiplication AST， 5-n