利用PCR-RFLP技术鉴定部分沙梨(PyruspyrifoliaNakai)品种自交不亲和基因型(S基因型).pdfVIP

利用 PCR-RFLP 技术鉴定部分沙梨（Pyrus pyrifolia Nakai）品种自交不亲和基因型（S 基因型） 1，2 1 3 3 1 辜青青 ，张青林 ，胡红菊 ，陈启亮 ，罗正荣 1 华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室，武汉（430070） 2 江西农业大学农学院，南昌（330045） 3 湖北省农业科学院果树茶业研究所，武汉（430209） E-mail ：luozhr@ 摘 要：自交不亲和基因型的鉴定，对于沙梨授粉品种选择及育种亲本选配具重要意义。 本试验利用 S 基因特异性 PCR-RFLP 技术并辅以人工授粉和 S 基因型信息，鉴定了我国 原产部分沙梨品种 S基因型；并分别在苍溪雪梨和灌阳雪梨中发现了 2个新的自交不亲 和等位基因 S 和 S 。 38 39 关键词：沙梨，自交不亲和基因型，PCR-RFLP 梨为蔷薇科植物，绝大多数品种自花授粉不能结实，相同自交不亲和基因型 （self-incompatibility genotype, S-genotype ）品种间异花授粉也不能结实，具配子体型自交不 〔〕 亲和（GSI ）性质 1 。该性质由单个S 位点上的复等位基因（self-incompatibility allele, S-allele or S-gene ）所控制，当花粉S 基因与花柱两个 S 基因均不相同时才能正常受精。在蔷薇科植 〔 〕 物中，花柱表达的与自交不亲和相关联的蛋白质为 S-RNase 2 。S-RNase 基因基本结构包含 5 个保守区（C , C , C , RC and C ）和 1 个位于 C 区和 C 区间的高变区（HV ），其中高变 1 2 3 4 5 2 3 〔〕 区包含一个具有长度和序列多态性的内含子 3 。 〔 〕 自交不亲和性基因型的鉴定方法主要有：田间授粉试验 4 ，花柱可溶性蛋白等电聚焦 〔 〕 〔 〕 〔 〕 电泳及分子标记法 5, 6 ，双向聚丙烯凝胶电泳法 7 ，授粉花柱离体培养法 8 ，S 基因特异性 〔 〕 〔〕 PCR 分析方法 9~16 等。S 基因特异性 PCR 分析是一种快速、简便的方法，已在苹果 9 、 〔 〕 〔 〕 〔 〕 〔 〕 扁桃 10 、李 11 、 甜樱桃 12 和梨 13~18 等果树 S 基因型鉴定中广泛应用。迄今，国外已 〔 〕 鉴定 10 个沙梨 S 基因， S ~S 1946 年由 Terami 等鉴定，S 于 2001 年鉴定 14 ，S 与 S 于 1 7 8 9 10 〔 〕