MGB—TaqMan探针实时荧光定量在快速检测产肠毒素大肠杆菌中的价值.pdfVIP

虫堡亟堕医堂苤查!嫂!生!旦筮堡鲞筮!翅垦!i!』旦!塑丛盟：里!i翌!翌!塑!：∑!!：垒!：塑!：! ．论著． MGB—TaqMan探针实时荧光定量在快速检测 产肠毒素大肠杆菌中的价值 代娟李玉峰袁粒星杨潇 【摘要】 目的采用MGB．TaqMan探针建立产耐热肠毒素大肠埃希菌实时荧光定量PcR检测 方法。方法针对编码大肠埃希菌耐热肠毒素I基因片段设计引物、MGB探针，采用外标法，绘制标 准曲线，进行实时荧光定量PcR检测。评价该方法的特异性，灵敏度，准确度，检测范围，重复性及稳 定性等。做阴性对照，排除假阳性，采用uNG酶抗污染。结果实验结果表明引物、探针特异性良 好，该方法的灵敏度可达到每反应3DNA拷贝，特异性强，检测范围在100一109拷贝每反应，重复性 及稳定性较好，整个过程只需要2h。结论该方法能快速、灵敏、特异检出产耐热肠毒素大肠埃希 菌，对控制由耐热肠毒素引起的腹泻性疾病具有重要意义。 【关键词】 大肠杆菌；分子探针；聚合酶链反应 coHreal-time reaction MGB- Detectionof Esche