牛抗菌肽Bac7-Bac5-β串联基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及表达产物的研究.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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牛抗菌肽Bac7-Bac5-β串联基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及表达产物的研究.pdf

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农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2008,16 (3): 380~384 ·研究论文 · 牛抗菌肽串联基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及其产物的活性分析赵昆 1,2 1 * 1 1 1 1 1 1 1 , 2 ，刘思国，王春来，宫强，迟磊，刘建东，王勇，云孟克，刘慧芳孙延鸣 1. ，哈尔滨 150001 （中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室； 2.石河子大学动物科技学院，石河子 832003）： GenBank ，人工合成了抗菌肽融合基因摘要根据中公布的牛抗菌肽和（基因）成熟肽基因序列 TM ，克隆到 BACTOBAC 重组杆状病毒表达系统的 pFAST HTb 载体中，构建了重组转座载体（，，抽提大分子 pFASTBac ，转化 DH10Bac 大肠杆菌）感受态细胞 PCR 方法筛选阳性菌落质粒 DNA，获得重组杆状病毒穿梭载体 Bacmid ，转染昆虫草地夜蛾( )Sf9 细胞出现病，重新感染草地夜蛾，收集，变后，收集含有重组病毒颗粒的培养上清 Sf9 单层细胞 Sf9 细胞超声破碎 12%SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳可见表达的融合蛋白带，分子量大小为 20 kD，表达量约占细胞总蛋白的 10.6％。体外抑菌实验表明重组的 rBac7Bac5 defense 蛋白对大肠杆菌，具有抑菌活性。： ; ; ;spodoptera fragiperda 9 (Sf9) ; ; 关键词牛抗菌肽