第4节定性定量分析.pptVIP

第三章色谱分析法 一、色谱定性分析 二、色谱定量分析 一、色谱定性分析 2.利用文献保留值定性 3.利用保留指数定性 保留指数计算方法 4.与其他分析仪器联用的定性方法 二、 色谱定量分析 2. 定量校正因子 （2）相对校正因子的测定 （3）外标法 * * 第四节定性定量分析 1.利用纯物质定性的方法 利用保留值定性：通过对比试样中是否具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质。用于组成不太复杂的样品，不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。 利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。 利用相对保留值γi/s定性 相对保留值γi/s仅与柱温和固定液性质有关。在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用来进行定性鉴定。 又称Kovats指数(Ⅰ)，是一种重现性较好的定性参数。测定方法： 将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。 其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃（其分别具有Z和Z＋1个碳原子）来确定的。被测物质X的调整保留时间应在某一相邻两个正构烷烃的调整保留值之间，如图所示： 例如（P53） 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱仪联用仪； 样品 样品 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D 气相色谱仪 (GC) 质谱仪 (MS) 分离 鉴定 B A C D 1. 峰面积的测量 （1）峰高（h）乘半峰宽（W1/2）法：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍： A = 1.065 h·W1/2 （2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积 A = h·（W 0.15 + W 0.85 ）/ 2 （3）自动积分和微机处理法 思考：色谱工作中用峰面积定量，是不是某组分的峰面积越大含量越高？ 不是 试样中各组分的量与其色谱峰面积成正比，即： m i = fi ·Ai 绝对校正因子：比例系数f i f i =m i / Ai （1）两种表示方法 因为：相同量的不同物质对于同一检测器响应不同 相同量的同种物质对于不同检测器响应不同 不可以直接用A（峰面积）定量 ★★★物理意义是每单位峰面积所代表物质的多少 例： 某试样含有5μg乙醇，测得相应的色谱峰面积为150mm2，求乙醇的fi。 解： 即每平方毫米色谱峰面积代表3.3×10-2μg乙醇。 绝对校正因子fi的大小主要由操作条件和仪器的灵敏度所决定，既不容易准确测量，也无统一标准；当操作条件波动时，fi也发生变化。故fi无法直接应用，定量分析时，一般采用相对校正因子。 相对校正因子Fi ：即组分的绝对校正因子与标准物质的绝对校正因子之比。 例： 准确称取一定质量的色谱纯对二甲苯、甲苯、苯及仲丁醇，混合后稀释，采用氢焰检测器，定量进样并测量各物质所对应的峰面积，数据如下： 物质 苯 仲丁醇 甲苯 对二甲苯 m/μg 0.4720 0.6325 0.8149 0.4547 A/cm2 2.60 3.40 4.10 2.20 以仲丁醇为标准，计算各物质的相对质量校正因子。 同理： 过程：精称i纯品＋基准物S→混匀进样→测Ai和AS 在气相色谱法中，对于热导检测器一般以苯为标准物；对于氢火焰检测器，一般以正庚烷为标准物。 （1）归一化法 3.常用的几种定量方法 各组分的质量分数为： 各组分的质量分数之和等于1，即： 优点：归一化法很直观，容易接受，计算简便、准确，当操作条件如进样量、流速等发生变化时，对计算结果的影响很小，是一种常用的计算方法。 缺点：必需所有组分都出峰。 必须已知所有组分的校正因子。 （2）内标法 当只需测定试样中某几个组分，或试样中所有组分不可能全部出峰时，可采用内标法。 方法：准确称取一定量的试样m样，加入一定量内标物mS，混合均匀进样分析。 根据试样、内标物的的量m样、 mS及在色谱图