HA基因密码子及表达载体优化的H5亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效果比较.pdfVIP

业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2006,14 (3): 30 1~306 ·研究论文· 基因密码子及表达载体优化的 H5亚型禽流感DNA 疫苗免疫保护效果比较* 1 1 1 2 1 3 1 永萍 , 张洪波 , 李呈军 , 步志高 , 邓国华 , 于康震 , 陈化兰 ** (1. 中国 业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/ 兽医生物技术国家重点实验室, 哈尔滨15000 1; 2. 中 农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室, 哈尔滨150001; 3. 农业部畜 兽医总站，北京 100026 ） ： ， 摘要 为评估 基因密码子优化及不同表达载体对H5 亚型禽流感DNA 疫苗免疫效果的影响 pC 、pCAGG 、 pCI 和pCAGG 分别以 100 和10 g 剂量一次免疫3 周龄SPF 鸡，4 周后分别用 100 的高致病力禽流感 病毒(HPAIV) A/Goose/GuangDong/ 1/96(H5N 1)[GD/ 1/96(H5N 1)]鼻腔途径进行攻击，观察发病与死亡情况，分别于攻毒后第3、5 、攻 和7 无采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况，同时检测免疫后 毒前及攻毒后血清HI 抗体、AGP 抗体的 ，对 。结果表明， ， 动态变化 4 种疫苗单次免疫的免疫保护效果进行比较评估 100 g 剂量组中 pCAGG 和pCAGG ）， ； 均可对免疫鸡形成 100 ％完全保护（不发病、不致死和不排毒 pCI (75%) 和pCI (50%)仅可形成部分免疫保护 10 ， 不发病和不致死）， g 剂量免疫组中 pCAGG 和pCAGG 可对免疫鸡形成 100％的保护（ pCI 可形成对 免疫鸡的部分免疫保护(75%) ，而pCI 则基本不能形成免疫保护。结果表明， 基因密码子的优化以及鸡 启动子 表达载体 pCAGGS 可显著提高H5 亚型禽流感DNA 疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平，增强免疫保护效果同时证明，通过 密码子和载体的优化，可使H5 亚型禽流感DNA 疫苗有效免疫保护剂量降低至 10 g