动物转基因技术的发展及应用17987.pdfVIP

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0fAnht6 安徽农业科学。Ja翻al A鲥.Sci.2009.37{5):1932—1933.1938 责任组辑常俊香责任校对张士敏 动物转基因技术的发展及应用 余露露1一,刘帅1,章嘎1,佟春玲1,关伟军1*,马月辉1,卿素珠2 (1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094;2.西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100) 摘要综述了动物转基因技术的发展及应用情况,并对目前常用的动物转基因技术及其优缺点做了较系统的概述,指出了该技术目骨 存在的问题,并对其发展前景进行了展望。 关键词转基因技术;外源基因;核移植 中图分类号S188文献标识码A 文章编号0517—6611(加∞)晒一01932一眩 动物转基因技术是指将外源基因或体外重组的基因结 前景。 构导入动物的受精卵内,使其在动物体内整合和表达,产生 2常用的动物转基因技术 具有新的遗传性状、并能将这种性状稳定地传递给后代的一 在动物转基因技术研究的近30年时间里,研究者们先 种技术。转基因技术打破了动物的种间隔离,使基因能在种 后探讨的转基因方法有10余种,但迄今为止,较成熟的方法 系很远的机体间流动,该技术将对整个生命科学产生全局影 并不多。据多数文献报道,目前动物转基因技术主要有以下 响,促进生物医学、农牧业和药物产业等多方面的发展。近 几种(表1)。 年来,动物转基因技术在技术的多样性和实用性方面均取得 表1动物转基因的常用方法及其优缺点 了显著进步。通过该技术已分别获得各种转基因鱼、转基因 方法 优点 缺点 兔、转基因羊、转基因牛等¨_2J。笔者综合相关文献,对动物 原核显微注可将较大片段的鼋组DNA注 成本较高、转基因效率较 转基因技术的发展及应用前景作一概述。 射法入原核,获得的转基冈动物 低。导入的外源基因为单 能有效地表达外源基因 位点、多拷贝整合 1动物转基因技术的发展 体细胞核移产生个体的外缘基因整合率 该技术还不成熟,很多技 植法 为100%。效率极高 术细节还有待完善和提高 从20世纪70年代中期开始,就有人尝试用各种办法向 反转录病毒操作简单,能有效将目的基 该法成功率较低,产生的 动物体内转移外源基因。1975年Gordon等用爪蟾的分化细载体法 因以单拷贝形式插入宿主染 转基因动物多为嵌合体 色体内,基因表达效率较高 胞进行核移植得到了蝌蚪,证实了两栖动物部分分化的细胞 胚胎干细胞外源基因的整合率较高 产生的转基因动物均为嵌 具有发育的全能性,细胞分化后基因组的改变是可逆的,基 介导法 合体,不易建立Es细胞系 因组中存在重新启动发育所需要的所有基因。该理论为哺 精子载体法整合率较高,成本较低 转基因效果不稳定 乳动物体细胞核移植技术的研究奠定了理论基础。 2.1原核显微注射法 该方法是制作转基因动物应用最 进入20世纪80年代以后,Gordon首先用受精卵原核注 广、效果最好的方法一J,由美国人Cordon所发明。该方法是 射法,将疱疹病毒基因SV40DNA段和PBR32DNA段分别注射 将外源基因或体外构建的目的基因在显微操作仪下用极细 到小鼠原核期的胚胎中,获得了相应的转基因小鼠bJ。1982

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