一株耐碱Mn_SOD高产细菌的分离_基因克隆及序列分析.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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一株耐碱Mn_SOD高产细菌的分离_基因克隆及序列分析.pdf

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China B iotechno logy, 2007, 27( 5): 101~ 106 Mn-SOD 1 1 2 1 1* 孟鑫阚国仕刘剑利王晓丹陈红漫 ( 1 110161 2 110036 ) 首次从长白山温泉土中筛选得到了一株高产耐碱 SOD 的细菌, 通过抑制剂试验定了该菌所产 SOD类型为M n-SOD通过形态特征生理生化特征及 16S DNA 基因序列分析, 与芽孢杆菌B ac illus sp. MO6 同源性高达 100% , 与地衣芽孢杆菌B acillus lichenfi orm is 同源性为 99% 根据地衣芽孢杆菌M n-SOD 序列, 并结合GenBank 中已发表的多种细菌M n-SOD 基因保守区, 分别设计引物, PCR扩增获得 600bp 的M n-SOD 全基因序列和 430bp 的核心片段, 克隆 sodA 全基因序列, 构建重组质粒 pMD 18-SOD 锰超氧化物歧化酶基因克隆序列分析 Q785 ( supe ox ide d ismu tase, SOD, EC. SOD , , 1. 15. 1. 1) (Ba cillus sp. ) M n-SOD [ 1] , , , , Cu, Zn-SOD M n-SOD , PCR Fe-SODN i-SOD[ 2, 3] M n-SOD sodA , , , , M n-SOD , M n-SOD SOD M n-SOD , SOD , , [ 4] , , 1 / 210 B acillus sp. 110-2 1. 1 M n-SOD , 1. 1. 1 土样 16S DNA , Buchhemi , 1. 1. 2 质粒与菌株 pMD 18-T, ( A p ) , J. A. 2004 O klahoma TaK aRaE. coli DH5A Ba cillus sp. 1. 1. 3 主要试剂 T aq DNA , 99% , , E coR IH in dIII( T aK aR a); 5--4--3--B-D- , ( X-gal), ( ) ; , , , -B-D-( IPTG ), ( Sigma ); ( BBI); , 1. 1. 4 培养基 : 0. 3%, 1% , 0. 5%, 1. 8% , pH7. 0 : 2006-09-11 : 2007-01-13 ~ 7. 2; : 1%, 0. 5% , * , : chenhm99@ sin a. com 1% , pH 7. 0; : 4% , 1% , 102 China B io techno logy Vo l. 27 No. 5