城市污水二级处理出水中沙门氏菌的PCR检测.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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城市污水二级处理出水中沙门氏菌的PCR检测.pdf

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第23卷第3期环境科学研究 V01．23，No．3 2010年3月 ResearchofEnvironmentalSciences Mar．，2010 城市污水二级处理出水中沙门氏茵的PCR检测曾颂，张崇淼，王晓昌+，魏梦楠西安建筑科技大学，西北水资源与环境生态教育部重点实验室，陕西西安710055 摘要：建立了一种利用PCR检测城市污水二级处理出水中沙门氏菌的方法．采用膜吸附一洗脱法浓缩二级出水水样中的沙门氏菌，通过选用一对涵盖性和特异性均较强的引物139和141，对浓缩后的沙『】氏菌进行PCR检测．利用正交试验法，对沙门氏菌PCR体系进行五因素四水平的试验，建立了沙门氏菌PCR的最佳体系．通过梯度PCR考察了退火温度对检测结果的影响，选择65℃作为退火温度，优化后沙门氏菌PCR体系的检测灵敏度可达0．314 ng／L．通过对已知细菌浓度的水样进行检 130 测，确定了该法检测水样中沙门氏菌的灵敏度为2 CFU／L．与传统MPN法的相比，该法在检测效果和检测效率上都优于 MPN法．关键词：二级处理出水；沙门氏菌；浓缩；正交设计；优化；聚合酶链式反应(PCR) 中图分类号：R123，X832文献标志码：A 文章编号：1001—6929(2010)03—0361—05 PCR in DetectionofSalmonella EffluentinM Secondary unicipal Treatment System ZENG Xiao—chang，WEIMeng—nan Song，ZHANGChong—miao，WANG LabofNorthwestWater and of ofArchitectureand Key Resources，EnvironmentEcology，MinistryEducation，Xi’an University 71 Technology，Xi’an0055，China Abstract：AmethodwasestablishedforthedetectionofSalmonellafrom effluentin wastewatertreatment secondary municipal system withthe ofPCR water wagconcentratedmembrane thenthe applicationtechnique．Thesample by adsorption-elutionoperation，and concentratedSalmonella 139 wasdetecteda of and haveboth and usingpair primers 141，which highergeneralityspecificity．The conditionforthePCRdetectionw∞obtained fivefactorsatfourlevels．Asaresult．65℃ optimal byorthogonalexperimentsregarding wagdeterminedasthe thedetecti