EPO对缺血2f再灌注损伤大鼠肾脏细胞凋亡及相关蛋白表达的影响.pdfVIP

MedicinalisAnhui2010 ·323· Universitatis 安徽医科大学学报Acta Jun；45(3) EPO对缺血／再灌注损伤大鼠肾脏细胞凋亡 及相关蛋白表达的影响 徐礼友，诸禹平，宣强，项平 摘要 目的观察促红细胞生成素(EPO)对急性缺血／再灌色试剂盒、原位细胞凋亡(TUNEL)试剂盒(南京凯 注(I／R)损伤大鼠肾脏细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响，探 讨EPO对急性肾脏I／R损伤保护作用的可能机制。方法 取30只Wistar大鼠随机分为3组，假手术对照组、I／R组和 中心)，6性(避免雌激素作用)，体重180～220g。 EPO干预组(I／R+T)，每组10只。I／R、IfR+T组采用夹闭 大鼠双侧肾动脉45min后，再灌注12h制备肾脏缺血再灌 统，日本JEOL一1230型透射电子显微镜等。 注损伤(IRI)模型，假手术组未行以上处理，I／R+T组术前 予EPO干预。并应用细胞凋亡原位标记法(TUNEL法)、免 1．2方法 疫组化技术等检测EPO干预后对肾脏细胞凋亡及bax、bcl一2 1．2．1动物模型复制将30只试验大鼠随机分为 蛋白表达的影响。结果通过电镜观察：假手术组未发现明 3组，即假手术对照组、I／R组、EPO干预组(L／R+ 显凋亡，L／R+T组较I／R组凋亡指数减少(13．4±1．5懈 T)，每组10只。I／R+T组术前20min经腹腔注射 28．04-2．3 4-0．12船0．834- P0．05)，bcl一2／bax增多(0．93 EPO500 0．09 U／kg，I／R组和假手术对照组注射等量生 P0．05)。结论EPO对大鼠急性肾脏I／R损伤具有 理盐水。0．5％戊巴比妥钠50 保护作用，其作用机制可能通过增加凋亡相关蛋白bel-2／ mg／kg腹腔注射麻 bax的比率，抑制细胞凋亡的过度表达。 醉，下腹正中切开，游离出肾脏和肾动脉，用哈巴狗 主题词肾移植；细胞凋亡；再灌注损伤；红细胞生成素 钳夹闭双侧肾动脉，完全阻断双肾血流45min，取下 自由词bel-2蛋白；bax蛋白 双侧。肾动脉上哈巴狗钳，观察肾脏颜色由紫红逐渐 中图分类号R 977．9 692；R617；R341；R363；R 变红，缝合腹部切口。假手术组仅打开腹腔游离肾 文献标识码A文章编号1000—1492(2010)03—0323—04 脏及肾动脉45min后缝合。各组大鼠正常饮食。 急性器官缺血／再灌注(I／R)损伤在。肾脏移植12h后0．5％戊巴比妥钠再次麻醉各组大鼠，打开 中是目前无法完全消除的一种常见的病理生理现 腹部缝线，穿刺心脏取血，并切除左。肾。血标本离心 象，可以导致急性肾功能衰竭和移植肾慢性纤维化， 分离血清冷藏以备肌酐和尿素氮的测定。肾组织用 在这一过程中最先受到损伤的细胞是肾小管上皮细 40g／L甲醛同定做原位凋亡及免疫组化检测，另取 胞。急性肾I／R损伤肾小管细胞除发生坏