水解胶原分子量测定方法的探讨[1].pdfVIP

第 3O卷第 1期 明 胶 科 学 与 技 术 V01．30．No．1 201O年 3月 TheScienceandTechnologyofGelatin Mar．2010． 水解胶 原分 子量测定方法 的探 讨 黄惠君 译编 原京安科技信息服务中心，北京 100011 摘要：本文简单地评述 了行业标准 “水解胶原 生变化，所以软凝胶柱的工作效率不高，不宜 蛋白QB2732—2005”的若干值得商榷 的问题 。 作为工艺控制的手段 ；同时，在确定标准时，未 介绍和推荐并 比较 了三种应用于表征水解胶 见到有关胶原蛋 白(肽)与所用标准样分子量 原(hydrolyzedcollagen，nc)分子量的方法。高 之间的对比实验结果。因此，在标准中使用此 压分子尺寸排阻色谱法 (}ligh—pressuresize— 方法的可靠性、可信性和适用性还值得作进一 exclusionchromatooaphy，I-IPSEC)采用一种亲 步的探讨 。 水性的大孔共聚物树脂色谱柱和一种含变性 水解胶原 (及明胶水解物)是由动物 (牛、 剂的水性洗脱液，用 以测定分子量分布、重均 猪、家禽和鱼)皮和骨内所含的胶原衍生得到 分子量和数均分子量；并验证 了用在标准条件 的蛋白质。其特征与性质表现为：水溶液极低 下测定的黏度和用 甲醛滴定法测定的数均分 的黏度、极淡或无气味、无色、透明、具乳化和 子量相对应地与用 HPSEC测定的重均分子量 稳定作用、起泡和成膜性能、溶解性、可分散 (对数坐标)和数均分子量的相关性。 性、粉末的可压缩性、可结合某些物质和低过 敏性。水解胶原通过 口服食物及药物方式进 上世纪 70年代末 、80年代初 ，原上海骨 入体内，对皮肤和头发表现 出极大的适应性， 胶厂工程技术人员胡维廉 、臧怀祖等试制 明胶 有利于它们的生长和修复。大量的研究表明。 水解物并用于当时的上海家化 日用品厂的产 水解胶原有利于骨关节炎和骨质疏松症的缓 品生产，引起行业同仁们的关注。原北京化工 解和治疗 。 学院黄 明智等就明胶水解物的制备和特性作 在工业生产 中，胶原、水解胶原 的分子量 较深入 的研究，在物质条件颇为 困难 的情况 分布 、结构和组成 ，和与之相关联 的功能性质 下，建立了不算十分精确但却能解决问题的简 取决于加工条件 ，以及用于胶原水解的原料和 便的分子量及分子量分布的实验方法，这一测 酶的专一性。据近一、二十年的专利介绍，某 定方法可能就是现行行业标准中 “相对分子质 些产品所使用的水解胶原蛋白肽对分子量及 量”测定方法的基础。但随着时代的前进、科 分子量分布有特殊的要求，就要求在生产工艺 技的进步，这一方法已不能完全适应作为工艺 中使用简单而精确的分子量测定方法，以保证 控制和产 品质量控制的要求 ，特别是行业标准 水解胶原制造过程及水解胶原分子量分布的 “水解胶原蛋 白QB2732—2005”l【中用 Sepha— 控制。 dex50作为色谱柱的起层析功能的多孔凝胶， 本文的目的就是在于推荐适用于工业生 其排阻限(2oooo～500)(G50排+阻限参阅文 产的简单而精确的方法来表征工业规模生产 献 )有限，像 Sephadex50这样的软凝胶柱进 的水解胶原的分子量及分子量分布。 行层析时压力差较小，致使层析速度不高，而 Htx3EC(高压分子尺寸排阻色谱法，hi小一 若超过容许的压差则将使色谱柱工作性能发 pressuresize—exclusionchromatography或高效 · 36 · 明 胶 科 学 与 技 术 2010年3月 分子尺寸排阻色谱法 ，h础 一performancesize— 探究水解胶原的平均分子量与在标准条件下 exclusionchromatography)，属于凝胶渗透色谱 所测定的黏度问存在这种关系的可能性。 (gel