促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注的保护作用及对VEGF及ICAM-1表达的影响-副本.pdfVIP

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注的保护作用及对VEGF及 ICAM．1表达的影响 孙晓佳孙字1 孙霓1 王胜军 李秀江1 (吉林大学第一医院重症监护科，吉林长春130021) [摘要】 000 h予腹腔注射EPlY3 采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉制作大鼠局灶性缺血再灌注模型。EPD预处理组于缺血开始前2 U／kg；缺血再灌注模 型组和假手术组在手术前2h予腹腔注射等量生理盐水。再灌注24 在缺血再灌注24 达、下调IcAM一1而实现的。 [关键词】促红细胞生成素；脑缺血再灌注；VEGF；ICAM-1 [中图分类号】R741[文献标识码】A 脑血管病(CVD)因其发病率、死亡率和致残率高而严重危脉，在距颈外动脉起始处1cm结扎并电凝颈外动脉主干，用无 害人类健康。脑缺血和缺血后再灌注损伤过程涉及极其复杂 创动脉夹分别夹闭右颈总动脉近心端和颈内动脉远端，在颈外 的病理生理过程…。近年来报道促红细胞生成素(EPD)是神动脉与颈内动脉分叉处置一丝线，打一活结，在颈外动脉残端 经系统中一个新的信号转导分子，对神经系统具有广泛的促生 0．5cm处剪一小口。将准备好的头端烧成光滑杵状的美国四号 长与保护作用，具有营养、抗炎症反应和抗凋亡等作用，能明显 尼龙线(直径0．2mm)经颈外动脉插入颈内动脉，将活结扎紧， 减轻脑缺血再灌注损伤。本实验拟观察EPO是否可以减小脑 松开动脉夹，将鱼线顺颈内动脉缓慢插入，进入深度为(18．5土 缺血后梗死砥积及再灌注损伤，以及对血管内皮生长因子 0．5)cm。生理盐水冲洗，关闭手术切口。切口外留约1cm长 (VEGF)、细胞间黏附分子．1(ICAM-1)表达的影响，以探讨脑 的鱼线，再灌注时将鱼线向外拉出至颈内动脉颅外段即可，手 缺血再灌注神经元损伤及EPD的保护作用机制。 000 组在缺血前2h予腹腔注射EPO(3U／kg)，缺血再灌注模 1材料与方法 型组和假手术组在手术前2h予腹腔注射等量生理盐水，假手 1．1实验材料健康Wistar雄性大鼠32只，无菌级，体重术组颈内动脉内插线深度10mnl，其操作步骤同缺血组。正 220～270 常对照组大鼠不手术直接处死，其余三组予缺血后24h处死。 g，由吉林大学实验动物部提供。饲料为繁育鼠全价 固体颗粒饲料，吉林大学实验动物部提供。EPO由沈阳三生制 (2)另选用健康成年雄性SD大鼠32只，按上述方法造模与分 药股份公司提供。兔抗鼠VEGF多克隆抗体、红四氮氯唑染色组，每组8只。缺血再灌注24h后行10％Trc染色，测脑梗死 (11’C)试剂盒及SABC试剂盒均购自武汉博士德公司；兔抗鼠的面积。 ICAM一1多克隆抗体(SantaCruz公司)；DAB显色试剂盒(福州 1．2．2标本采集与组织学检查 10％水合氯醛过量麻醉， 迈新公司)；水合氯醛、PBS及其他试剂均为国产分析纯级。 37℃生理盐水250Inl经心脏灌注快速冲洗去除血细胞，再用 1．2方法 4℃多聚甲醛250ml灌注固定后断头取脑，4％多聚甲醛后固定 24～48 1．2．1动物分组及动物模型制作(I)健康Wistar雄性大鼠h后，石蜡包埋．切片，HE染色，光镜观察组织学变化。 32只，随机分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、缺血再1．2．3 灌注模型组(C组)、EPO干预组(D组)．每组8只。参照Longa 坚牢紫水溶液浸染20一30rain；(3)