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生物技术通报
- 研 究 报 告 · BloTEcHNoLoGY BULLETIN 2009年 第 11蓍
单克隆抗体与多克隆抗体配对 ELISA方法比较
张小兵 邸禄芹 吴萌 闫静辉
(河北省生物研究所，石家庄 050081；河北医科大学第三医院，石家庄 050051)
摘 要 ： 以人绒毛膜促性腺激素(HCG)为抗原，制备 出对 HCG的多克隆抗体和特异性单克隆抗体 ，并进行抗体纯化和
特性分析 ，利用辣根过氧化物酶(HRP)分别对其进行 了标记。采用双抗夹心 ELISA试验 ，探讨 了多克隆抗体与单克隆抗体配
对的若干事项。结果表 明，利用单克隆抗体和酶标多克隆抗体配对，并用含动物血清 的稀释液稀释酶标抗体 ，可实现对检测
原 的高特异性和高灵敏度检测 。
关键词 ： 单克隆抗体 多克隆抗体 抗体配对 ELISA法
StudyoftheOptimum PairingofPolyclonalAntibodiesand
M onoclonalAntibodieswiht Sandwi chELISA
ZhangXiaobing DiLuqin WuMeng YanJinghui
(。BiologyInstituteofHebei，Shjiiazhuang050081；
TheThirdHospitalofHebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050051)
Abstract： Usinghumanehorionicgonadotrophin(HCG)astheantigen，polyclonMantibodiesandmonoelonalantibodies(McAbs)
specificforHCG weregenerated，characterizedand highlypurified．Thentheseantibodieswerelabeled withhorseradish peroxidase
(HRP)．Byadoubleantibodysandwichenzyme-linkedimmunosorhentassay，severa]problemsoftheoptimumpairingofpolyclonalan—
tibodiesandmonoclonalantibodieswerediscussed．Theresultsshowedthatwithmonoclonalantibodyastrappingantibodyandpoly—
clonalantibodylabelingwithenzymeastestingantibodywhich shouldbedilutedwiht animalseraasdiluent，thesandwichELISAhada
highlyspecificityand sensitivitytodetectantigen．
Keywords： Monoelonalantibody Polyclonai natibody Optimum pairingofnatibodies SandwichELISA
当前 ，抗体不仅仅用于医学和生物学，它的应用 1 材料与方法
范围已扩大到农业、工业、基础研究 、环境保护和食 1．1 主要 试 剂和仪 器
品检测等各个方面。特别是近几年来 ，抗体在动植 新西兰大 白兔 (河北实验动物中心)，雌性 BALB／c
物疾病的防治方面越来越活跃。尤其今年 ，在快速 小鼠(河北实验动物 中心)，HCG抗原 (1450U／mg，
大量检测奶粉中三氯氰胺的过程 中，抗体类试剂盒 系 自行提取)，LH、FSH两种标准品均系卫生部上海
更是凸显了其无比的优越性。但对于抗体配对问题
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