自发性高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞培养及鉴定.pdfVIP

泸州医学院学报 2013年 第 36卷 第 1期 JournalofLuzhouMedicalCollege Vo1．36 No．1 2013 论著 自发性高血压大鼠阴茎海绵体平滑 肌细胞培养及鉴定 ；i： 马福年，姜睿 (泸州医学院附属医院泌尿外科，四川泸州 646000) 摘 要 目的：探讨 自发性高血压大鼠(SHR)阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞体外培养 的方法 、生物学性状及 WKY大 鼠CCSM 细胞培养的 别 方法 ：采用组织块培养法并应用差速贴壁法进行纯化 ，倒置相等显微镜观察其形态 ，免墁荧光与流 式细胞仪法进行鉴定 。结果：镜下可见平滑肌细胞呈梭形生长、平行排列及部分区域峰一谷现象，免搜荧光显示胞浆d一叽动蚩白 染色呈 性。WKY大鼠CCSM细胞第 4d开始从组织块边缘游离 ，SHR大鼠CCSM 细胞第 8d开始游离卅 。WKY SHR 夫鼠CCSM 细胞经纯化一次后纯度(％)：WKY=97．00+1．03，SHR=84．9()±5．99，差异具有统计学意义(P0)(1)；WKY与 SHR大 鼠CCSM细咆经两次纯化后纯度 (％)：WKY=98．24_+105，SHR=96．92+1．06，其 异无统计学意义(P0．05)。结论：SHR与WKY 人鼠CCSM 细胞的原代培养在生长时间及纯化上存在显著差异，但可通过适当方式缩小其蒡异并在短期内获得大量高纯度 SHR大鼠CCSM细咆 ，为高血压性勃起功能障碍 的研究奠定基础。 关键词 阴茎海绵体 ：平滑肌细胞 ；细胞培养；大鼠 中图分类号 Q343．6：R544．1 文献标识码 A 文章编号 1000—2669(2013)1—0010—05 Cultureandidentificationofcorpuscavernosum smoothmusclecellsof spontaneoushypertensiverat MaFunian，JiangRui DepartmentofUrology,theAffiliatedHospitalofLuzhouMedicalCollege Abstract0bjective：Tostudythemethodandbiologicalcharacteristicsofculuredcorpuseavernosnnl smoothmuscle (CCSM)cellsofspontaneoushype~ensiverat(SHR)invitro，andthedifferencesbetweenthe curtucreofSHR andnormalWKY rat．Methods：Themethod oftissuepiececultureandtechniqueofsticking wallwithdifferentialspeedwereappliedtopurifythecells，Morphologyofcultured cellswasobservedunderthe inverted contrastmicroscope；immune fluorescence and flow cytometricmethod were used for identification． Results：Microscopically，smoothmusclecellsexhibitedspindlegrowth，parallelarrangementandsomeregional peak-valleyphenomenon．Immunofluorescencedisplayedpositivecytoplasm 仪一actin dyeing．CCSM cellsofW KY ratsstartedtofreefrom tissuemassedgeat4d；thatofSHRbeg