PCR-微阵列法检测沿岸海水致病性创伤弧菌及危害评估.pdfVIP

第28卷 第2期 海 洋 环 境 科 学 Vo1．28 。No．2 2009年 4月 MARINE ENVIRONMENTALSCIENCE Apr ． 2 0 0 9 【技术与方法】 PCR一微阵列法检测沿岸海水致病性创伤弧菌 及危害评估 郑泽军 ，李永君 ，魏晓娜 ，朱 琳 ，黄熙泰 (1．南开大学 生命科学学院生化与分子生物学系，天津 300071；2．南开大学环境科学与工程学院，天津 300071) 摘 要：本研究建立了PCR和寡核苷酸探针阵列杂交技术，方便、快速、准确地检测了海水中创伤弧菌的存在状况。本项检 测针对创伤弧菌的两个重要毒性基因whA，viuB，其中viuB可以对普通环境株和致病株进行区分。渤海湾沿岸6个采样点， 共60个沿岸海水样本被用于这一方法的评估，得到了这些采样点所在区域创伤弧菌的分布，毒性株的存在状况的信息。 关键词：创伤弧菌；海水；viuB；vvhA 中图分类号：P734．4 文献标识码 ：A 文章编号：1007-6336(2009)02-021l—D4 DetectionofVibriovulnificusandevaluationofvirulencebyPCRand microarrayin coastalseawater ZHENGZe-jun’，LIYong-jun ，WEIXiao—na，ZHULin ，HUANGXi．tai’ (1．DepartmentofBiochemistryandMolecularbiology，CollegeofLifoScience，NankaiUniversity，Tia in300071China；2．Col- legeofEnvironmentalScienceandEngineering，NankaiUniversity，Tianjin300071，China) Abstract：Vb／ro／vulnificusisasignificnatpathogentohumanbeings，nadhasawidedistributioninthemarineenvironment．Asthe developmentofseawatermaricuhure，tourismandincreasingconsumptionofseafood，theinvestigationofVb／r／ovulnificusinseawater hasbecomemoleandmoreimportant．Inthisstudy，amethodcombineduseofPCR nadoligonucleatideprobearrayhybridizationwas developedforthedetectionofVibriovulnfiicusincoastalseawateraswellasinvestigationofvirulence．Thetragetgenesusedfordetec- tionwere vvhAandviuB；bothofthemaleimportnatvirulencegenesofVb／r／ovulnfiicus．Besides，viuBwasspecificforpathogenic ． Vibriovulnifwusstrains．Atotalof60coastalseawatersamplescollectedfrom6sitesinBoHaiGulfweretestedtoshowedthedistribu— tionofVb／r／ovulnfiicusnadexistenceofviurlentstrains． Keywords：Vibriovulnfiicus；seawater；viuB；vvhA 创伤弧菌是一种 自然分布于海洋环境中的低度嗜盐