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卷 期
! # 微 生 物 学 报 ’( )! 1’ ) #
年 月
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!#$ 亚型禽流感病毒血凝素基因的原核表达及间接
%’() 方法的初步建立
，
# # # # $ #
郑其升 张晓勇 刘华雷 李 鹏 陈溥言
#
（南京农业大学 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京 $#%%7 ）
$ 河北省畜牧兽医总站 保定 ）
（ %A#%%%
摘 要：根据 公布的 亚型禽流感病毒（ ）血凝素（ ）基因序列设计引物，用 方法扩增
C+D/E F1# GH FG IJK F1#
亚型禽流感病毒 基因，将该片段定向插入到原核表达载体 （ ）中，构建原核表达载体 。阳性
FG# L9256$/ M L925FG#
质粒转化宿主菌 （ ），经 诱导， 基因获得表达，重组蛋白以包涵体的形式存在。通过改变
DN$# O96 HI2C FG# HI2C
的浓度和诱导时间，确定了表达 基因的最佳诱导条件： 终浓度为 ，诱导时间为 。
FG# HI2C % P3::’(Q N 6R S+TU+- ,(’U
分析表明表达产物具有良好的免疫学活性。以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测 亚型 抗体的
F GH ;FG5
方法。结果表明，抗原的最佳包被浓度为 ，血清的最佳稀释度为 ，阳性标准初步定为：
9NHVG ! WQ:N #X $%% !待检血清
!
Y % P，且 !待检血清Q ! 阴性血清 Y $ 。
关键词： 亚型禽流感病毒，血凝素基因，原核表达，
F1# ;FG59NHVG
中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ）
ZA3 G %%%#54$%7 $%% %#5%%35%!
禽流感（ ， ）是由 型流感病毒 法，为 新型
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