不同方法对石榴果皮总RNA提取效果的影响(2).pdfVIP

河南农业科学 不 同方法对石榴果皮总 RNA提取效果的影响 张 四普 ～，汪 良驹 ，李东伟。 (1．河南省农业科学院 园艺研 究所 ，河南 郑州 450002；2．南京农业大学 园艺学 院，江苏 南京 210095； 3．新郑市林业局 ，河南 新郑 45l100) 摘要：比较 了3种 RNA提取方法提取石榴果皮 RNA 的效果。结果表 明：改 良CTAB法提取 的总 RNAOD值在 1．91左右 ，得 率为 48 g／g；Trizol法提 取 总 RNA OD值 在 1．15左右，得 率为 86~tg／g；试剂盒提取得到的总 RNA OD值在 1．24左右 ，得率为 124ptg／g。分别反转录为 cDNA， 根据 不 同植物花 青素合 成关键酶基 因保 守序 列，设 计 简并 引物进行 RT—PCR，其 中只有 改 良 CTAB法得到的 cDNA有扩增条带。表 明改 良CTAB法 比较适合富含 多糖和酚类物质石榴果皮 总 RNA 的提取 。 关键词 ：石榴 ；CTAB；RNA 中图分类号 ：$665．4 文献标识码 ：A 文章编号 ：1004—3268(2010)10～0097—03 EffectofDifferentM ethodsonExtractionof TotalRNA from thePeelofPomegranate ZHANGSi—pu～。WANG Liang—ju孙 ，LIDong—wei。 (1．InstituteofHorticulture，HenanAcademyofAgriculturalSciences，Zhengzhou450002，China； 2．CollegeofHorticulture，NanjingAgriculturalUniversity，Nanjing210095，China； 3．XinzhengForestryBureau，Xinzheng451i00，China) Abstract：ThreeRNA extraction methodsfrom pomegranate peelwere compared．The result showedthattheOD valueoftotalRNA was1．91bymodifiedCTAB，theyieldwas48~g／g；the 0DvalueoftotalRNAwas1．15byTrizolmethod，theyieldwas86 g／g；the0D valueoftotal RNAwas1．24byRNA extractedkit，theyieldwas124,ug／g；thecDNAsweregotbyreverse transcription．A pairofdegenerateprimerswasdesignedbasedontheconserveddomainofCHS thatwasoneofthekeygenesofanthocyanidinsynthesisofeightplants．OnlythecDNA from the improvedCTAB hadoneamplifiedbandbvRT —PCR ，theothershadnobands．Sotheimproved CTAB methodwassuitableforRNA extractionofpomegranatepee1． Keywords：Pomegranate；CTAB；RNA 石榴系石榴科石榴属落叶灌木或小乔木 。石 性好 的总 RNA是 后续 RT—PCR、Northern杂交 、 榴叶片、果 皮、果 汁、种子 、根均具有独特 的医疗价 cDNA文库构建等分子生物学研究 的基础。虽然 目 值 。近年来 ，科研人员发现 ，石榴 中含有延缓衰老和 前提取植物总 RNA方法有多种[ ，但 由于不 同植 减缓癌变进程的高水平抗氧化剂 。这些必将为石榴