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[ ] 完整蛋白质鉴定：基于UNIFI 的沃特世生物制药系统 解决方案 目的 基于UN IFI的完全一体化分析平台突破了以往采集、 ® 以单克隆抗体完整蛋白的UPLC /MS分析为 处理色谱及质谱数据的局限性，并可自动生成报告。 例，展示UNIFI™ 科学信息系统这个平台在精 确质量测定、数据处理和报告方面的强大 功能。 背景 生物治疗药物得到了越来越多的关 注，无论是药监部门还是生物制药企 业，有效剖析单克隆抗体(mAb)尤为 重要。在同一软件平台中实现数据采 集和处理，并同时满足审计追踪的要 求，是符合法规要求的重要因素。 蛋白质药物会发生翻译后修饰，如 糖基化等，由于糖基化在生物系统 中有几项重要的功能，因此，准确鉴 定抗体药物的糖基化情况是蛋白药 物监管指导原则中的一部分。为确保 生物药物的安全性和有效性，快速、 准确地对糖蛋白进行分析是十分必 要的。 图 1. UNIFI生成的曲妥珠单抗完整蛋白分析 报告。从上往下看，该报告包含了可用于积 ACQUITY UPLC® H-Class Bio系统的高分辨 分的色谱峰、不同价态的质谱数据分布、以 色谱峰形式表达的去卷积化数据、综合的处 生物分子分离能力与Xevo® G2 Tof 高质 理后的数据，右下角是根据质量所得到的主 量精度的高分辨飞行时间质谱检测 要糖型的总结表。 技术相结合，为生物药物分析实验室 提供了常规分析用的UPLC/MS系统。 [[ ]] 每个mAb分析都会产生一个非常庞大的数据组， 需要对各种不同的糖基化修饰进行阐释，以便 对最终产品进行综合鉴定。这个步骤会限制其 它高通量分析过程的效率，并且很难实现自动 化。 基于UN IFI的完全一体化分析平台突破了以往采 图 2. 图-1中右下角表格的放大视图，该表列出了完整单克隆抗体（mAb ） 的质量测定结果和精确指定的mAb不同糖型。 集、处理色谱及质谱数据的局限性，并可自动生 成报告。 数范围内的去卷积处理后数据。去卷积图谱反映了抗体药物的几个主要的 糖型，与葡萄糖残基数量和岩藻糖基化程度对应。另一个报告的格式是表 解决方案 格，该表列出了完整单克隆抗体（mAb ）的质量测定结果和不同糖型（图-2 ）。 为解决数据分析耗时长的问题，促进治疗用单 报告还列出了曲妥珠单抗不同糖型的质谱峰的测量值以及与理论值之间 克隆抗体（mAb ）的数据处理，基于UNIFI的生物 的误差，并列出了TIC色谱图的色谱保留时间。 制药系统解决方案专门配置了完整蛋白分析方 这样一种完整的LC/MS分析方法使用户可灵活运用原始数据和处理后的数 案。 据，并进行快速而有效的数据管理。 这是一个完整的方案：采集了UPLC/MS数据后， 以高通量方式进行全自动的数据处理和结果 标注，得到的数据结果可在导出后进行数据管 理。 总结 曲妥珠单抗的UPLC/MS分析以全自动的方式进 本应用通过单克隆抗体（mAb ）完整蛋白分析应用展示了基于UNIFI的生物制 行，使用0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液分 药系统解决方案的强大功能。 别用作流动相液A和B。为成功进行色谱分离，色 现代仪器系统和先进的分析技术突破了生物制药企业以往的限制，能够对 谱柱的温度必须设定至80 °C。这套完整的生物 其生产过程进行严格的监控。 制药系统解决方案包括如下要素：ACQUITY UPLC H-Class Bio系