7株变形杆菌的O抗原基因簇的破译和特异基因的鉴定。pdf.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 变形杆菌广泛存在于自然环境中及动物的肠道中。变形杆菌具有多形性，运动 活泼，有迁徙生长现象。变形杆菌属于条件致病菌，是导致泌尿系统感染的常 见致病菌，也可引起食物中毒。 多数变形杆菌的O抗原化学结构已被破译。变形杆菌O抗原基因簇的研究， 对于解析变形杆菌O抗原多样性的形成机制具有重要作用。O抗原特异基因均 存在于O抗原基因簇中，基于特异基因的特异分子标识的筛选，为变形杆菌分 子分型系统的建立奠定基础。 本研究利用变形杆菌基因簇两侧的持家基因上的引物扩增7株变形杆菌的 O抗原基因簇；用鸟枪法构建O抗原基因簇文库；用ABI3730测序仪对插入片 断进行测序；运用生物信息学方法对序列进行拼接，预测开放阅读框，并对基 因功能进行分析，进一步通过PCR方法鉴定了这些变形杆菌的血清型特异基因 及特异引物。 经分析发现，7株变形杆菌的0抗原基因簇均位于cpx．4基因和secB基因之 间。cpxA到甲基转移酶基因按照5’．3’的方向转录。其余基因按照3’．5’的方向转 录。变形杆菌O抗原基因簇的平均CG含量较低，在30％-．33％之间。变形杆菌 。抗原基因簇中的基因与其O抗原结构相对应，并具有多样性。变形杆菌的O 抗原基因簇中均包含ugd、甲基转移酶基因，丝氨酸乙酰基转移酶基因以及 NAD(P)H依赖的甘油．3．磷酸脱氢酶基因。通过实验鉴定了特异基因wzy，基于 该基因的引物经验证可作为特异分子标识，为分子分型方法的建立提供了基础。 关键词：变形杆菌；脂多糖；O抗原基因簇；特异基因 Abstract Abstract Proteus tothe of is belongs familyEnterobacteriaceae，andGram—negative in humans bacteria．ProteusOCG珊S theintestinesof andawide of naturally variety manuresoiland waters．Someare has motile．Ita animals；also polluted species is human characteristic竹swarming什pattern．Proteusopportunisticpathogen,and for human tractinfections． responsiblemany urinary Mostofthe0 structuresofProteushavebeenidentifiexl．neof antigen study for Proteus0 clusterswillbeusefulclarificationofthemechanismofO antigengene andthe methodsfor ofmolecular Proteus． variety development antigen serotyping Proteus0