多重PCR检测整合子及其在分析金葡菌耐药中的作用.pdfVIP

摘要 多重PCR检测整合子及其在分析金葡菌耐药中的作用 硕士研究生赵永静 导 师沈燕 郑州大学第一临床学院医院 郑州450052 摘要 目的：建立多重PCR检测I类、II类和III类整合子，分析这三类整合子在 介导金黄色葡萄球菌多重耐药中的作用。方法：1)菌株来源：180例金黄色葡萄 药敏试验：采用K．B法检测金黄色葡萄球菌对20种抗生素的敏感情况。3)使 用基因组DNA提取试剂盒和高纯96质粒提取试剂盒分别提取基因组DNA和质 增产物。结果：1)本研究建立的多重PCR可同时检测出I类整合子、II类整合 子和III类整合子。2)药敏结果显示，在检测的20种抗生素中，不同来源的金 黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、环丙沙星、阿莫西林／ 棒酸、四环素等具有广泛的耐药性。3)比较细菌质粒DNA和基因组DNA中整 合子的检出情况，质粒DNA中I类整合子和lI类整合子阳性率均高于基因组 DNA(PO．05，P0．05)。4)根据CLSI2009金黄色葡萄球菌用药选择标准， 按照金黄色葡萄球菌所耐抗生素种类不同将菌株分为A、B、C三组：A组为耐 青霉素、头孢西丁、苯唑西林的单一耐药菌株；B为耐红霉素、阿奇霉素、复方 新诺明、克拉霉素、克林霉素，利奈唑胺的多重耐药菌株；C为耐阿莫西林／棒 酸，哌拉西林／他唑巴坦，环丙沙星，四环素，利福平，亚胺培南，头孢唑林， 头孢呋辛，左氧氟沙星，庆大霉素的多重耐药菌株。因III类整合子只检出l例， 不做统计分析，I类整合子在三组中的检出率差别有统计学意义(PO．01)，I 类整合子检出阳性率C组最高，其次是B组，A组最低；II类整合子三组差别 摘要 无统计学意义(尸O．05)。5)研究痰液、血液、脑脊液、引流物、分泌物、尿 液六种标本中耐药金黄色葡萄球菌质粒中整合子检出情况，六类标本中I类整 合子检出率进行比较，差别显著(PO．05)，多重耐药比率高的样本分离出的金 黄色葡萄球菌，其质粒携带I类整合子的比率也高，多重耐药比率低的样本分 离出的金黄色葡萄球菌，其质粒携带I类整合子的比率低。六类标本中lI类整 合子检出率进行比较，差别无统计学意义(PO．05)。结论：1)多重PCR是检测 I类、II类和III类整合子的有效方法，具有节省时间和费用的优点。2)耐药金 黄色葡萄球菌质粒中I类和II类整合子携带率高于基因组DNA，提示金黄色葡 萄球菌中质粒是传递整合子的主要载体。3)耐药种类越多的金黄色葡萄球菌I类 整合子的携带率越高，提示整合子参与介导金黄色葡萄球菌的多重耐药形成。4) 多重耐药比率高的样本分离出的金黄色葡萄球菌质粒I类整合子的携带率也较 高，说明耐药金黄色葡萄球菌所处环境对其携带整合子有影响。 关键词：整合子多重PCR多重耐药金黄色葡萄球菌 Ⅱ Abstract Detected PCRandTheirEffectson Integrons byMultiplex ’ ’ Antibioticecnatsiresistance。’’、‘ser-citOtOIDitnAsueru‘AUreus Staphylococcus Zhao PostgraduateYongjing TutorProf． fanShen Clinical LaboratoryDiagnostics TheFirstAffiliated