原型泡沫病毒与BST2相互作用的初探.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 viruses，FVs)作为反转录病毒中相对独立的一类病毒， 泡沫病毒(Foamy 其转录调控、基因组结构与功能以及生活周期存在诸多与众不同之处。如异于 与其亲缘关系较近的其他反转录病毒的强致病性，FVs在机体感染中长期潜伏， 至今未发现它们与任何疾病相关。然而，FVs感染体外培养组织却能够引发强烈 细胞病变。目前研究普遍认为FVs在机体水平的潜伏感染可能是机体多层次、 多水平的抗病毒机制与病毒之间长期共进化而相互制衡的结果。 BST2作为一种新近发现的抗病毒因子，是一种干扰素诱导蛋白，能够抑制 多种包膜病毒的释放。目前研究认为BST2的抗病毒作用具有广谱性和直接性， 即其抗病毒功能的发挥不需要病毒蛋白或宿主蛋白的协助，仅与其自身的高级 结构以及亚细胞定位相关。与之相对应，现已发现许多致病病毒已经进化出抵 效应的相关报道。 ． 为解析FVs与BST2相互关系，本文构建了人源BS他真核表达质粒，首先 验证BST2在瞬时转染的条件下能够完成正常修饰并形成二聚体，能够在细胞中 正常分布。随后本文利用本室建立的原型泡沫病毒(PFV)指示细胞系(PFVL)， 检测了过表达BST2细胞中PFV的释放情况，实验结果证明，人源BST2能够 有效的抑制PFV的释放，且并不影响PFV中Gag蛋白的合成及剪切。此结果为 BST2抗病毒作用的广谱性及直接性提供了进一步证据。 进而，本文还针对PFV感染对细胞中BST2的影响做了初步探究，即在病 毒感染的条件下，分别从BST2的启动子活性、mRNA以及蛋白水平探究了可能 存在于PFV中的抵抗BST2的机制。实验结果显示，PFV感染细胞后能够不同 程度的激活BST2启动子；随着病毒感染时间的延长，HeLa细胞中的BST2的 mRNA水平呈现增高趋势；最后，本文对病毒感染对于BST2的蛋白水平进行分 析，发现在PFV感染24小时后，HeLa细胞中内源BST2的量有所增加。 综上，本文结论为PFV在体外感染的条件下，可抑制PFV的释放，而PFV 感染可刺激BST2的表达。推测其作用机制与病毒感染刺激细胞产生干扰素相 关，BST2作为一种干扰素诱导蛋白能够有效的抑制PFV的释放；而PFV可能 T 中文摘要 尚未进化出抵抗BST2的有效机制。 据此，本文结果支持如下推论：机体对于泡沫病毒复制的抑制作用是多方 面、多层次的，BST2是机体免疫防御FVs的有效手段，可能是FVs区别于其他 致病性反转录病毒，并在机体中处于长期潜伏状态且不致病的原因之一。 关键词t原型泡沫病毒；BST2；相互作用；干扰素；潜伏感染 Ⅱ Abstract Abstract viruses(FⅥale retrovirusesfortheir Foamy uniqueamong highlycomplex andlife genome，complicatedtranscriptionalregulationcycle．What’Smore，distinct fromtheirclose as relatives，such HW-l(human 1)， immunodeficiencyviruse，type FVssucceedin latentinfection establishing inall lifelong can causesevere effects