干扰素调节因子7对人类8型疱疹病毒复制影响.pdf

摘要 摘要 factor 干扰素调节因子7(Interferon 7，IRF7)是宿主抗病毒防御反应 regulator 的关键性调节因子，它在诱导I型干扰素的合成，以及在细胞先天免疫反应中 都扮演着极其重要的角色，是干扰素调节因子家族中最重要的成员之一。 本文初步确定了Il讧7对人类8型疱疹病毒(HHV-8)复制的影响，实验证实， 能在病毒复制和转录激活蛋Et(RTA)的作用下进入裂解状态，转染后表达的IRF7 能够在一定程度上抑制RTA介导的激活和裂解；在Vero细胞系中建立起稳定的 潜伏感染的重组病毒rKS叭219，会维持低水平的裂解复制，通过本文工作发现， IRF7能够将rKSHV．219维持在潜伏状态，抑制其向裂解状态的转换。使用RNA 干扰的方法可消除IRF7的表达，解除IRF7对病毒复制的抑制作用。 IRF7的活性可能受到乙酰化、泛素化和类泛素化修饰的调控，而这些修饰 一般都发生在赖氨酸残基，我们猜测，赖氨酸残基在IRF7的修饰过程中可能具 有重要的作用。本文用定点突变的方法将IRF7中的6个赖氨酸残基分别突变为 相同电荷的精氨酸，最终获得IRF7全部15个赖氨酸残基的单氨基酸突变体， 胞系，以检测赖氨酸突变对IRF7功能的影响。结果表明，赖氨酸残基影响IRF7 的功能，包括激活IFNal启动子的能力、激活IFNl5启动子的能力、抑制RTA 激活ORF57启动子的能力、抑制初次感染病毒进入裂解复制的能力和抑制潜伏 感染病毒进入裂解复制的能力。大部分赖氨酸残基突变其影响是基本一致的， 即突变体与野生型相比其多种功能协同表现为不变。减弱或丧失：有的突变体 IRF7功能表现接近野生型，比如IRF7K50R、K209R；有的突变体IRF7功能比 野生型IRF7有了一定程度的减弱，如IRF7K45R：有的突变体IRF7功能较野 K92R。 生型IRF7几乎完全丧失，比如IRF7 本文工作为研究IRF7对病毒复制的影响和蛋白修饰在IRF7功能中的作用 积累了材料，为进一步阐明IRF7在宿主抗病毒防御反应中的作用提供新的思路。 关键词：干扰素调节因子7、赖氨酸残基、裂解复制、激活、抑制 Abstract Abstract Interferon factor beenidentifiedasoneofthe regulatory7(IRF7)has major inviralinducedI IFN thatiscentraltoinnate regulators type production immunity． Thus．IRF7 rolesina of important varietybiologicsystems． plays Inthis triedto outtheinfluenceoftheIRF7onthe study,wefigure replication ofHuman foundthatIl心7 the herpesvirus8(HHV-8)．We repressedlyticreplication infectionbut thevirus．IRF7 ofHHV-8．notinthe alsointhereactivationof only themethodofRNA