宫颈癌高危人群HPV16及18感染检测方法的建立.pdfVIP

第 40 卷　第 1 期 青 岛 大 学 医 学 院 学 报 Vol. 40 , No. 1 2004 年 3 月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE QIN GDAO UNIVERSITATIS March 　2004 宫颈癌高危人群 HPV16 及 18 感染检测方法的建立 1 2 3 1 1 闫志勇 ,王景和 ,姜健阁 ,王 　斌 ,钱冬萌 ( 1 　青岛大学医学院微生物学教研室 , 山东 青岛　266021 ; 　2 　德州卫生学校 ; 　3 　德州地区人民医院) ( ) [摘要] 　①目的 　建立宫颈癌高危人群人乳头状瘤病毒 HPV 16 及 18 感染的检测方法。 ②方法 　对 HPV16 及 18 E6/ E7 基因序列进行序列比较分析 ,根据二者的共享序列设计通用引物 ,进行外侧扩增 ;在通用引物 扩增序列之间分别设计 HPV16 和 18 的特异性引物 ,分别进行半套式 PCR 扩增 , 以检测并鉴定女性宫颈分泌物中 HPV16 及 18 的感染。对该方法的敏感度和特异度进行了测定 ,并用该法对 31 例宫颈癌病人和 113 例对照组妇女 宫颈分泌物进行了检测。③结果 　PCR 扩增后 HPV16 、HPV18 分别有 341 、430 bp 和 109 、473 bp 的带产生。该反 μ ( ) 应体系最低可检测浓度为 3 g/ L 。用该方法对人类基因组DNA 、人类巨细胞病毒 HCMV 和大肠埃希菌 DNA 以 及其他型别的 HPV 进行检测 ,均未见假阳性结果产生。宫颈癌病人 HPV16 的感染率为 67. 7 % ,HPV18 的感染率 ( 2 ) 为 19. 4 % ,明显高于对照组 χ= 31. 52 、6. 26 , P 0. 01 、0. 05 。④结论 　HPV16 、HPV18 感染与宫颈癌的发生密 切相关。本研究建立的方法具有特异度和敏感度高、简便、快速等特点 ,可推广应用于临床检测。 [ 关键词] 　乳头状瘤病毒 ;宫颈肿瘤 ;聚合酶链反应 [ 中图分类号] 　R373 　　[文献标识码] 　A 　　[文章编号] (2004) ESTABLISHMENT OF A METHOD FOR DETECTING HPV16 AND HPV18 IN HIGHRISK POPULATION OF CERVICAL CARCI ( NOMA 　YA N Zhiyon g , WA N G Ji nghe , JIA N G Jiange , et al 　 Department of Microbiology ,Qingdao University Medical College , Qingdao 266021 , China) ABSTRACT 　Objective 　To set up a method for detecting human papill