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- 2017-09-02 发布于重庆
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DNA的粗提取与鉴定 ———— 海安李堡中学 张云 无论是果胶酶还是加酶洗衣粉中的酶制剂,都是从细胞中提取出来的。从今天开始,我们学习生物化学成分的提取与改造技术。 基础知识: DNA粗提取的原理 提取DNA的溶解性原理包括哪些方面? 提取DNA的原理包括DNA的溶解性和耐受性两个方面。 DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。 〖思考1〗分析图5-1。DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使DNA溶解,需要使用什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度? 在0.14mol/L时溶解度最小;较高浓度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出。 〖思考2〗 在溶解细胞中的DNA时,人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水,以稀释NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂,但DNA却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中蛋白质可溶于酒精。问:采用DNA不溶于酒精的原理,可以达到什么目的? 将DNA和蛋白质进一步分离 〖思考3〗 提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时,应选用怎样的酶和怎样的温度值? 蛋白酶,因为酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为60~80℃,因为该温度值蛋白质变
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