国外猪增生性肠炎诊断方法研究进展.pdfVIP

养猪 SWINEPR0DUCT10Nf31 国外猪增 生 性肠 炎诊 断方 法研 究进展 唐 娜 ，沈志强--，管 宇 ，王金 良 (1．山东省滨州畜牧兽医研究院，山东 滨州 2566O0；2．山东绿都生物科技有限公司，滨州 256600) 中图分类号：s855．14．4 文献标志码：A 文章编号：lo02一l957(20O9)03—0o54一O3 摘 要：猪增生性肠炎(P0rcinePr0liferativeEnterifjs，PPE)在全球大部分国家的养猪地区均有分布， 是影响养猪业的世界性疾病之一。感染猪发病时临床表现大多不明显或缺乏特异性，使得该病的诊 断出现一定难度。国外曾先后建立多种检测技术，用病理剖检、组织染色、免疫组化等方法检测肠损 伤情况，用酶联免疫吸附试验(EuSA)、间接免疫荧光抗体试验、免疫过氧化物酶单层试验等方法检 测血清中胞内劳森菌抗体水平，用PcR等方法直接检测粪便中病原。以上方法根据其不同特点适用 干不同场合的诊断。目前对EuSA和PCR方法的研究有较大进展，已有大量临床应用方面的报道。 关键词 ：猪增生性肠炎；胞内劳森菌；诊断方法；ELlSA；PCR 猪增生性肠炎 ，又称猪增生性肠病 (P0rcine 肠”。打开肠腔，可见溃疡面常呈条形，毗邻的正常黏 Pr0l rativeEnteroDamv，PPE)、猪 回肠 炎 (P0rcine 膜呈岛状。根据临床症状及剖检病变仅可做出初步 Ileitis)、猪肠腺瘤病 (P0rcineIntestinalAdenomat0sis) 诊断，PPE弓l起的肠炎临床表现无法从肉眼上与猪 和猪增生性出血性肠炎 (PorcinePmliferateHaemo卜 圆环病毒病等引起的肠炎相区分，确诊还需要进行 rhacEnteritis，PHE)等，是猪 的一种接触性肠道传 进一步的实验室诊断[。 染病，严重影响猪生长速度和饲料转化率，已成为具 1．2 组织染色法 有重要经济意义的世界性疾病。迄今为止，美国、澳 常用的染色法有wanhin—Starry银染法 、HE染 大利亚、墨西哥、加拿大、荷兰、丹麦、巴西、阿根廷、 色法等。D emeier等_61将wanhin—Starrv银染法、阿 日本、韩国等地均有发病报道，以欧美等地发病率较 尔新蓝和 HE这 3种常见染色方法结合起来，用 高 (50％～70％) 1。目前国内也有发病报道，但对该 于 663例猪结肠样本 PPE的组织学诊断，发现 11 病的研究仍处于起步阶段。本文总结了十几年来国 例有严重的腺瘤样增生，肠上皮细胞内有细菌着 外在 PPE诊断方法上的研究进展，以期为国内PPE 色；16例样本出现腺瘤样增生，杯状细胞消失，但 诊断与防治研究提供参考。 未发现胞 内劳森菌。此方法与传统warthin—Starrv 引起猪增生性肠炎的病原是胞内劳森菌 删一 法相 比更为敏感 ，可 以用于某些时期大量样本的 son eZZMZ ，u)，它是一种专性胞内寄生菌， 快速诊断。 其生长需要某些特定细胞 (如 鼠肠上皮细胞系 IEC— l-3 免疫组化法 l8)，不能在无细胞培养基中培养，因此不能采用常 免疫组化是应用抗原与抗体特异性结合 的原 规细菌学方法进行 PPE诊断I。国外使用的诊断方 理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定 法主要有组织病理学诊断、血清免疫学诊断以及分 组织细胞内抗原 (多肽或蛋白质)，对其进行定位、定 子生物学诊断技术等。 性及定量的研究。 m等[在2000年首次用抗 TJI膜 1 组织病理学诊断 蛋白单抗建立免疫组化法，检测增生性肠上皮细胞 1．1 病理剖检 胞质顶端是否存在 IJI菌，并与 PCR鉴定结果进行 PPE的剖检病变多见于回肠和结肠 。肠壁增 比较。B0esen等 用U感染猪的肠黏膜刮出物免疫 厚，肠管外径变粗，浆膜下和肠系膜常见水肿。肠黏 Balb／c小鼠，制备出单抗 lawl—DK，试验证明该单抗 膜呈现特征分枝状皱瘤，黏膜表面湿润而无黏液，有 为