乳腺癌基因治疗2010.docVIP

【关键词】? 乳腺癌；基因治疗；肿瘤乳腺癌是一种常见的妇科肿瘤，约占全身恶性肿瘤的7%～10%，近20年来在我国的发病率逐渐升高，已严重威胁女性健康，仅次于宫颈癌。针对早期（Ⅰ、Ⅱ期）乳腺癌的治疗方法有外科手术切除、放疗、内分泌治疗以及使用抗肿瘤药物进行治疗（如紫杉醇、维甲酸类等），但对晚期乳腺癌的治疗效果不佳。由于肿瘤是一种多基因参与的分子疾病，基因治疗乳腺癌应能取得较好的疗效。基因治疗的方法有体外和体内治疗，具体导入方法又分为病毒和非病毒载体介导，一般临床试验方案采用病毒作为载体。本文就乳腺癌基因治疗的策略作一综述。?1? 调节机体免疫系统通过诱发针对肿瘤细胞相关抗原（TAA）特异性免疫反应的治疗，提高肿瘤细胞的免疫原性，激发机体抗肿瘤免疫。??1.1? 导入免疫原性相关分子　参与肿瘤细胞免疫识别相关基因表达产物（如HLA、B7等）的降低可使肿瘤细胞的免疫原性降低。Pulaski等［1］用转染编码MHC和B7.1基因的肿瘤细胞作为肿瘤疫苗，治疗诱导BALB/c鼠产生的乳腺癌细胞4T1，实验证明能有效抑制癌细胞的自发转移。Dissanayake等［2］利用逆转录病毒将编码MHC和β链及CD80基因转染到鼠SaI肉瘤、B16黑色素瘤及4T1乳腺癌细胞作为肿瘤细胞疫苗，结果可以激活肿瘤特异性的CD4+T淋巴细胞。由于这些癌细胞自身能表达MHC，因此可以与CD8+T淋巴细胞协同作用，产生高效的特异性抗肿瘤免疫并保持长期的免疫记忆。??1.2? 导入免疫反应相关的细胞因子??将某些细胞因子（如IL等）的基因转染到机体免疫细胞（如TIL,LAK细胞及细胞毒淋巴细胞）中，可提高或诱导机体抗肿瘤免疫。Oshikawa等［3］用基因枪将IL，IL前体及IL转化酶的cDNA重组表达载体注射到鼠乳腺癌模型，IL与IL的联合作用加强了细胞毒T淋巴细胞（CTL）的毒性作用以及NK细胞的杀伤性，并能诱导IFN的产生，增强了抗肿瘤活性，可完全抑制乳腺癌细胞TS/A。MUC1粘蛋白是一类高分子糖蛋白，在乳腺癌等多种肿瘤中过表达，且糖基化畸形和不完全可导致新的抗原肽表位暴露，成为肿瘤免疫治疗的靶分子。有报道用MUC1单链抗体和IL融和蛋白（C595scFv）治疗MUC1阳性的MCF乳腺癌细胞，可刺激增殖活化的淋巴细胞并活化NK细胞，杀死癌细胞［4］。国内也有报道使用细胞因子GM能加强muc1基因疫苗诱导小鼠产生的特异性CTLs及体液免疫应答，抑制小鼠乳腺癌细胞EMT6的生长［5］。??1.3? 激发针对不同肿瘤相关抗原的免疫反应? 树突状细胞（DC）是专职抗原递呈细胞，可诱导出高效而特异的抗肿瘤免疫。将肿瘤抗原转染入DC产生特异性免疫反应是这一领域研究的重点。有报道将乳腺癌细胞与DC融合形成肿瘤疫苗激活机体免疫反应，可促进抗癌效应［6］。还有研究发现DC捕获凋亡的乳腺癌细胞可诱导肿瘤特异性的T淋巴细胞分化，产生大量CTLs杀死乳腺癌细胞。这是一种新的免疫基因治疗乳腺癌的方法，可识别乳腺癌共有的抗原［7］。还有一些在乳腺癌突变率较高的癌基因和抑癌基因（如HER等），它们的蛋白结构的变异也可形成肿瘤细胞特有的抗原决定族，这些突变的基因也可用来制成DNA疫苗；但肿瘤患者自身的系统性免疫耐受能否被一两个抗原所打破还需进一步的实验研究。?2? 肿瘤细胞与正常细胞差异表达的基因???2.1抑制癌基因的治疗???原癌基因是人体细胞固有的基因，其表达产物在正常状态下为细胞增殖分化所必需，在特定条件下，原癌基因被激活诱导细胞恶性转化或恶变。抑制癌基因的功能可以达到治疗肿瘤的目的。与乳腺癌发生有关的癌基因主要有HER等［8］，有20%的原发性乳腺癌与人表皮生长因子受体（HER又称HER）有关，其定位于17q24，编码具有酪氨酸活性的跨膜蛋白，控制细胞增殖、血管生成以及细胞能动性、转移和抗凋亡的信号传导，基因扩增和过表达为主要突变形式［9］。Hortobagyi等［10］完成了用阳离子脂质体介导具有抗肿瘤活性的5型腺病毒基因E1A和HER启动子，腔内注射治疗人乳腺癌和卵巢癌细胞的Ⅰ期临床研究，结果表明，E1A在两种细胞都有表达并伴有HER的下调表达，促进凋亡，抑制增殖，为进一步Ⅱ期临床试验提供了有力证据。针对erbB过表达的人乳腺癌细胞，也可使用RNA干扰技术（RNAi）沉默其表达，使癌细胞周期停滞在G0/G1期，有效抑制癌细胞增殖，诱导凋亡［11］。此外，一种人源重组单克隆抗体Herceptin（荷赛停）能与HER蛋白的胞膜外肽段结合，从而抑制信号传递过程，该药于1998年被美国FDA正式批准用于乳腺癌的临床治疗。有15%～25%的乳腺肿瘤出现c扩增和过表达，并导致预后不良或癌细胞具有侵袭性的临床特性。Jamerson等［12］研究发现，凋亡蛋白Bax的表