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1118 Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery, September 2009, Vol. 23, No.9 · · • 干细胞与组织工程 • Y 染色体性别决定基因监测BMSCs 治疗 兔股骨头坏死的实验研究 邓冰 权毅 潘显明 张波 廖冬发 蒋凯 马泽辉 周劲松 刘金标 荣卫平 【摘 要】 目的 探讨BMSCs 移植治疗兔股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head，ONFH ）后细胞在 体内的存活情况及坏死股骨头内新骨形成情况。  方法 4 ～5 月龄新西兰大白兔49 只，雌性48 只，雄性1 只，体重 2.0 ～2.5 kg 。取兔股骨及胫骨内骨髓，采用密度梯度离心法行BMSCs 分离培养并传代。取第3 代细胞行 1，1’- 双十八 烷-3，3，3’，3’- 四甲基吲哚羰花青- 高氯酸盐（1，1’-dioctadecyl-3，3，3’，3’-tetramethylindocarbocyanine perchlorate，DiI ） 8 荧光标记，制备浓度为2.5 × 10 个/mL 细胞悬液。采用局部液氮注射冷冻法制备兔右侧ONFH 模型。将雌兔随机分为3 组， 每组16 只，A 组单纯造模为对照，B 组造模后注射自体DiI 荧光标记BMSCs 悬液4 μL，C 组造模后注射雄兔异体DiI 荧 光标记BMSCs 悬液4 μL。术后2 、4 、6、8 周各组分别处死4 只动物，行双侧股骨头X 线观察，取股骨头标本行HE 染色 及Masson 染色，测定新生骨小梁在股骨头所占的体积百分比。取心脏、肺、肝、脾、肾组织及股骨头标本组织，荧光显微镜 下观察各组织中DiI 荧光标记细胞的表达，PCR 检测各组织中Y 染色性别决定基因（sex determining region of the Y，Sry ） 的表达。  结果 术后动物均存活至实验完成。X 线片示A 组股骨头随时间延长逐渐出现骨坏死；B 、C 组股骨头骨密 度逐渐增加，未出现骨坏死。组织学观察示B 、C 组随时间延长骨组织修复明显，A 组无明显变化。各时间点B 、C 组新 生骨小梁占股骨头体积百分比均高于A 组，比较差异均有统计学意义（P 0.01 ），B 、C 组间比较差异无统计学意义（P 0.05 ）。术后各时间点B 、C 组心脏、肺、肝、脾、肾组织均未见DiI 荧光标记细胞。PCR 结果显示，3 组各时间点心脏、肺、肝、 脾、肾组织中均未见Sry 基因表达；C 组各时间点股骨头标本可见Sry 基因的表达，A 、B 组未见。  结论 异体BMSCs 移植后细胞可在股骨头局部存活并诱导新骨形成，并未见体内其他组织中再分布。 【关键词】    BMSCs 股骨头坏死 Y 染色体性别决定基因    兔 中图分类号： R681.8 R318.06 文献标志码：A STUDY ON EVALUATING SEX DETERMINING REGION OF THE Y AS A ENGRAFTING TRACK OF BMSCs TRANSPLANTATION FOR REPAIRING OSTEONECROSIS OF THE FEMORAL HEAD OF RABBIT/DENG Bing, QUAN Yi, PAN Xianming, ZHANG Bo, LIAO Dongfa, JIANG Kai, MA Zehui, ZHOU Jingsong, LIU Jinbiao, RONG Weiping. General Hospital of Chengdu Military Command, Chengdu Sichuan, 610083, P.R.China. Corresponding author: QUAN Yi, E-mail: quanyi56@ 【Abstract 】 Objective To evaluate sex determining region