家兔原始卵泡卵母细胞体外发育的培养体系研究.pdfVIP

青岛农业大学学报 (自然科学版) 26(4)：265～270，2009 JournalofQingdaoAgriculturalUniversity(NaturalScience) 文章编号 ：1674—148X(2009)04—0265—06 家兔原始卵泡卵母细胞体外发育的培养体系研究 翟向玮，孙理兰，张 攀，潘庆杰，沈 伟 (青岛农业大学动物科技学院动物生殖发育与基因工程研究所，山东 青岛266109) 摘要：本研究根据家兔卵巢的发育特征初步探讨了家兔卵巢卵母细胞体外发育的培养体系。采集新生或30日龄 家兔卵巢在不同培养液中培养，并分析家兔卵母细胞的体外发生与成熟情况与体内正常发育的兔卵巢卵母细胞之 间的差异 ，来筛选和优化家兔卵巢卵母细胞的体外培养体系。本试验从高糖 DMEM、FSH浓度、BSA／血清等3个方 面来筛选较好的培养条件，结果表明：①不添加高糖 DMEM的M199培养液与添加的相比，卵巢上卵母细胞数量要 多，但随着培养时间的延长，组织块上卵母细胞的形态会变得不清楚 ；②家兔卵巢组织在 FSH浓度为50和 100mI U／ml、添加血清的DMEM／FI2培养液中生长较好，体外培：养24d后，卵母细胞数量多，直径增加到65I．zm；③与添加 BSA的培养液相比，添加血清的培养液中的卵巢卵母细胞生长状态较好，体外培养 28d后 ，卵母细胞数量多 ，并且 直径可达 65txm。 关键词：家兔；卵巢 ；原始卵泡 ；卯母细胞；体外培养 中图分类号：$814．4 文献标识码 ：A InVitroCultureandDevelopmentofRabbitPrimordialFollicularOocytes ZHAIXiang—wei。SUNLi—lan，ZHANGPan，PANQing-jie，SHENWei cInstituteofAnimalReproductionDevelopmentandGeneticEngineering，CollegeofAnimalScienceandTechnology，QAU，Qingdao266109．China} Abstract：Invitrocultureofrabbitprimordialfollicularoocyteswasinvestigatedinthisstudy．Toselectaoptimal invitroculturesystem ofrabbitprimordialfollicleandoocytes，ovariesofnewbornorday一30rabbitswerecultured indifferentbase—mediumsplusFSH withdistinctdensities，andtheectogenesisandmatureofoocytesweredeter— minedcomparingwiththesameageinvivo．Thebettercuhureconditionwasselectedfrom threeaspectsinourex— periment，forexampledensityofFSH、highglucoseDMEM、BSA／FCS．Theresultsshowthat：① therearemore0一 ocyteswithintheovarytissuesculturedinM199withouthigh glucoseDMEM thanthatwithhighglucoseDMEM- butthentheshapeofooeytesaremoreandmoreunclearinbothtwoteams．② OvariesculturedinDMEM／F12and FCSplus50or100mIU／mlFSH growwerethebestinallexperimentalgroups，andwithmoreandbiggeroocytes evenreaches65Ixm after26daysinvitroculture．③ ThergowthofovariescuhuredinthemediumplusFCSwas betterthan thatofovariesculturedinthemedium plusBSA，andwithmoreandbigger