基因工程酶学基础.pptVIP

第二章 基因工程的酶学基础 第一节 　限制性内切核酸酶—“分子手术刀” 第二节 　DNA连接酶——“分子缝合针” 第三节 　DNA聚合酶和反转录酶 第四节 　DNA 修饰酶 第五节 　外切核酸酶 第六节 　单链内切核酸酶 第七节 　ＲＮＡ酶 核酸酶(nucleases):是指通过切割相邻两个核苷酸残基之间的磷酸二酯键，使核酸分子发生水解断裂的酶。 按底物不同分为： DNA酶（DNase ） RNA酶（RNase ） 底物非专一性核酸酶 按作用部位不同分为： 5′末端外切酶 核酸外切酶 3′末端外切酶 核酸内切酶 第一节 限制性核酸内切酶 .切点： 1. 来源 限制（Restriction） 限制性内切酶将侵入细菌体内的外源DNA切成小片断。 修饰：细菌自身的DNA碱基被甲基化酶修饰所保护，不能被自身的限制性内切酶识别切割。 二、限制性内切核酸酶的类型 1. I 型限制性内切酶 1968年首先由M. Meselson和R. Yuan在从大肠杆菌 B株和 K株分离的 如 EcoB和 EcoK （1）识别位点序列 未甲基化修饰的