适用于蛋白质双向电泳棉花胚性培养物蛋白质提取技术.pdfVIP

　棉 花 学 报 　Cotton Science 　　2009 ,2 1( 1) :3～9 研究与进展 适用于蛋白质双向电泳的棉花胚性 培养物蛋白质提取技术 曹景林 , 朱龙付 , 谭家福 , 邓锋林 , 李允静 , 郝 　娟 , 徐士成 , 张献龙 (华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室 ,武汉 430070) 摘要 : 以陆地棉品种 Co ker 20 1 为材料 ,对与甲醇/ 醋酸铵丙酮沉淀结合的酚抽提法和裂解液 配方进行了优化 ,建立了适用于蛋白质双向电泳体系的棉花胚性培养物蛋白质样品制备技术 。 对胚性培养物 ,通过添加 PV P P 研磨和丙酮 、TCA/ 丙酮 、甲醇/ 醋酸铵等有机溶剂的系列洗 涤 ,然后再进行酚抽提 ,蛋白质质量得到显著改善 ,获得的 2D E 图谱质量高 、可分辨的蛋白质 点数多 。比较分析 3 种裂解液对蛋白质的溶解效果发现 ,在裂解液中混合采用 7 mol ·L1